赤霉素GA3的高效液相色谱检测方法及对小鼠机体的氧化损伤作用研究

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本研究在现有方法的基础上优化了色谱条件和样品前处理过程,建立了一种快速、精确的赤霉素(GA3)检测分析方法及简便的样品前处理方法,并对部分市售果蔬样品进行残留量分析检测,为我国制定相关标准、保障食品安全提供参考。另外,本文通过研究GA3对小鼠不同脏器的氧化损伤作用,探讨了GA3对机体的毒作用机制。结果如下:1.优化的色谱条件HPLC条件为键合固定相C18反相柱,紫外检测器,检测波长206nm,流动相为甲醇与7.5mM甲酸水的体积比为4:6的溶液,流速0.4ml/min,柱温40℃,进样量10μL经过反复调试流动相的组成和流速,样品保留时间稳定,具有更好的峰形。2.样品前处理方法采用丙酮-水提取剂结合超声波萃取法提取GA3;并通过石油醚脱色、乙酸乙酯萃取结合C18固相萃取小柱吸附对样品进行提纯。与其他方法相比,除杂效果好,待测样品纯净度高,省时。3.部分市售果蔬GA3残留情况一些早熟果蔬品种和芽菜类GA3残留量较高,黄豆芽和早熟葡萄最为严重,分别达到3.17 mg/kg和2.3mg/kg,超出了欧美国家残留标准。4.GA3对小鼠体质量的影响及对脾脏、肝脏、肾脏和心脏组织的氧化损伤作用(1)对脏/体比的影响染毒后各组间体质量无显著性差别;788 mg/kg bw剂量组肝体系数显著低于溶剂对照组(P<0.05),说明该剂量的GA3对小鼠肝脏有一定的影响;与溶剂对照组相比,染毒组体质量和心、肾体系数无统计学意义;脾体系数随着剂量的增高出现上升趋势,但无统计学意义。(2)对肝脏和脾脏的影响在394和788 mg/kg bw剂量条件下,脾脏和肝脏的各氧化应激指标改变明显。脾脏SOD、GSH-Px活性分别比对照组降低了21.01%,29.02%和23.36%,35.03%,肝脏相应指标分别降低了9.01%,13.05%和12.81%,16.17%,经统计学处理差异显著(P<0.05,P<0.01);相同剂量组的MDA含量,脾脏和肝脏分别升高了19.06%,23.61%和22.33%,26.39%,经统计学处理差异显著(P<0.05,P<0.01)。(3)对肾脏的影响394和788 mg/kg bw两个染毒剂量,使肾脏SOD、GSH-Px活性有所上升,与对照组相比,分别上升了22.34%和40.20%;MDA含量有所下降,与对照组相比分别下降了35.93%和30.05%。结果均具有统计学意义。(4)对心脏的影响染毒组的各项指标与阴性对照和溶剂对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:本研究所建立的果蔬GA3残留检测方法线性良好,相关系数大于0.999,平均加标回收率为93.10%,最低检测限为0.012μg/g,一些早熟果蔬品种和芽菜类GA3残留量较高;GA3对小鼠不同组织器官的氧化应激表现不同,对肝脏、脾脏有氧化损伤作用,对心脏作用不明显,对肾脏可能有保护作用。
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