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目的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性非特异性炎症性肠病,主要局限于黏膜及黏膜下层。近20年来,我国的UC发病率逐渐升高,目前已成为我国消化系统常见病。该病治愈难度大、复发率高、预后差,为终身性疾病,具有致残性,为现代难治性疾病,也是中医药在消化胃肠疾病领域研究的热点和难点。本研究以雄性SD大鼠为研究对象,观察不同剂量温清溃结饮对葡聚糖硫酸钠(dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎的干预作用,并探讨其对TLR4/My D88/NF-k B信号通路的影响。方法(1)SPF级雄性SD大鼠60只,体重(190±20)g,实验前适应性喂养一周。随机分为为空白组、模型组、美沙拉嗪阳性药对照组、温清溃结饮高剂量组、温清溃结饮中剂量组、温清溃结饮低剂量组,每组10只。除空白对照组外其他5组均自由饮用5%DSS水溶液,构建SD大鼠溃疡性结肠炎模型。造模24小时后,从第2天至第八天给予药物干预,第9天取材。空白组和模型组给予生理盐水,美沙拉嗪组0.03g/kg/d给药干预,温清溃结饮高剂量、中、低剂量组分别是1.2g/kg/d、0.6g/kg/d、0.3g/kg/d,每天灌胃一次。(2)每日观察实验动物一般情况、记录摄食量,饮水量。于给药的第3、5、7天进行体重、旷场实验得分、易激惹程度积分检测并记录。用以评价UC疾病动物模型的可能的中医证型。(3)通过疾病活动指数(DAI)评分、HE染色及组织病理学评分、检测MPO的活性水平。用于评价动物UC的疾病模型。(4)Elisa法检测血清中p-选择素、MPO、IL-6、TNF-α水平,Real time-PCR、Western-blot法检测TLR4、My D88、NF-κBp65的基因和蛋白的表达。评价温清溃结饮对UC的治疗作用及对TLR4/My D88/NF-k B通路的影响。结果(1)DSS诱导的大鼠溃疡性结肠炎,在自由饮用5%的DSS水溶液24小时后,造模组即出现肉眼黏液脓血便和便潜血阳性,体重与空白组比较略有下降,提示造模成功。(2)比较各组大鼠体重,与空白组比较,模型组大鼠体重显著下降(P<0.05),美沙拉嗪、温清溃结饮高中剂量组能显著阻止大鼠的体重下降(P<0.05)。(3)与空白组比较,模型组的DAI评分明显升高(P<0.01);与模型组比较,美沙拉嗪、温清溃结饮高、中剂量组能降低大鼠的DAI评分(P<0.05,P<0.01)。HE染色结果显示,与模型组比较,美沙拉嗪、温清溃结饮高、中剂量组能降低大鼠的结肠病理组织评分(P<0.05,P<0.01)。(4)ELISA结果表明,与模型组比较,美沙拉嗪、温清溃结饮高、中剂量组能降低大鼠血清中的MPO、P选择素、TNF-α、IL-6的表达(P<0.05,P<0.01)。(5)WB结果显示,与模型组比较,美沙拉嗪、温清溃结饮高、中剂量组能显著抑制大鼠结肠组织中的TLR4、My D88、NF-κB p65蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。(6)QPCR结果显示,与模型组比较,美沙拉嗪、温清溃结饮高、中剂量组能显著抑制大鼠结肠组织中的TLR4、My D88、NF-κB p65mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)结论(1)温清溃结饮对DSS诱导的溃疡性结肠炎模型有较好的治疗作用,能够抑制该动物模型的体重下降、结肠组织病理损伤;能有效抑制血清促炎因子的表达,达到缓解病情的作用。(2)温清溃结饮对DSS诱导的大鼠溃疡性结肠炎有很好的治疗作用,其治疗作用机制可能与抑制TLR4/My D88/NF-ΚB信号通路有关。