行气调神针刺法对缺血性卒中后抑郁模型大鼠脑左前皮质及海马CREBmRNA和PDE4mRNA表达的影响

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目的:观察行气调神针刺疗法对缺血性PSD模型大鼠脑左前皮质及海马CREBmRNA和PDE4mRNA表达的调节作用,探讨行气调神针刺疗法治疗缺血性PSD的作用机理,初步阐明cAMP通路上重要调节因子CREB和PDE4对缺血性PSD发病的影响,为针刺治疗缺血性PSD的腧穴配伍提供实验理论基础。方法:1.选择80只健康的雄性SD大鼠,月龄在7-8月,体质量是300g±50g,行OPen-Field行为评分,采用随机数字法将评分相近的SD大鼠产生17只作为正常组,其余大鼠采用凝闭大脑中动脉法(MCAO)制备脑缺血模型,1周后行Zea Longa神经行为学评分,有51只SD大鼠脑缺血模型复制成功,随机分为针刺组、西药组、模型组各17只。实验过程中严格遵守“3R”原则。在行Zea Longa神经行为学评分的同时即予以7种慢性不可预见的应激方法(CUMS)结合孤养以制备抑郁模型。在应激的第8天开始针刺和西药治疗,1次/天,14天一疗程,每疗程之间间隔1天,模型组和正常组仅给予0.9%生理盐水,按1mL/100g进行灌胃处理,疗程与针刺组和西药组相同。2.在慢性应激刺激的第1天、治疗的第21天和第42天,给予大鼠Zea Longa神经行为学和敞箱试验;于慢性应激的第2天、第9天、第16天和第23天观察大鼠蔗糖水的饮用量;在慢性应激结束后的第1天行Morris水迷宫试验。治疗结束后,立即取材,采用RT-PCR检测。结果:1.与西药组相比,针刺组的蔗糖水消耗量、敞箱试验水平运动得分、Morris水迷宫空间记忆能力、皮质CREBmRNA表达及海马PDE4mRNA表达,无明显差别(P>0.05)。而针刺组的敞箱试验垂直运动得分、Morris水迷宫学习能力、Zea Longa神经行为学评分、海马CREBmRNA表达和皮质PDE4mRNA表达均优于西药组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。2.与正常组比较,西药组的蔗糖水消耗量、敞箱试验水平和垂直运动得分、Morris水迷宫学习及空间记忆能力和Zea Longa神经行为学评分均差于正常组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),皮质和海马CREBmRNA的表达明显增强与正常组比较有明显差别(P<0.01)。皮质和海马PDE4mRNA表达明显降低与正常组比较有统计学意义(P<0.01)。模型组的蔗糖水消耗量、敞箱试验水平运动和垂直运动得分、Morris水迷宫学习及空间记忆能力、Zea Longa神经行为学评分均不及正常组,差异有统计学意义(P<0.01),皮质及海马CREBmRNA的表达均明显低于正常组,差异有统计学意义(P<0.01),而模型组皮质与海马PDE4mRNA的表达明显增强与正常组相比较,差异有统计学意义(P<0.01)。针刺组的蔗糖水消耗量、敞箱试验水平和垂直运动得分、Morris水迷宫空间记忆能力、Zea Longa神经行为学评分均不及正常组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),而Morris水迷宫学习能力的测定与正常组疗效相当(P>0.05),针刺组皮质及海马CREBmRNA的表达增强与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.05),海马PDE4mRNA表达明显下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),而皮质PDE4mRNA的表达与正常组则无差别(P>0.05)。3.与模型组比较,针刺组和西药组的蔗糖水消耗量、敞箱试验水平及垂直运动得分、Morris水迷宫学习及空间记忆能力、Zea Longa神经行为学评分均优于模型组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。西药组和针刺组皮质及海马CREBmRNA的表达均明显提高,PDE4mRNA的表达均明显降低,与模型组有明显差别,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:行气调神针刺疗法可能通过调节CREBmRNA和PDE4mRNA在脑内的信号表达而达到抗抑郁的作用。
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