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目的:探讨五首活血化瘀方对急性心肌缺血犬(心血瘀证模型)心肌细胞凋亡的影响及机制,比较各方作用的差异。 方法:先按体重分层,再用随机数字表法随机将35只犬分为7组:对照组,心肌缺血组,丹参饮组,血府逐瘀汤组,失笑散组,活络效灵丹组,桃红四物汤组,灌胃给药,每天一次,给药剂量20ml/kg,对照组及心肌缺血组予蒸馏水,连续灌胃5天。各给药组于第5天灌胃后穿线结扎冠状动脉左前降支第二角支处,造成急性试验性心肌缺血模型(心血瘀证模型),对照组仅穿线不结扎。造模后3h采血,测定血清肌酸磷酸激酶(CPK),乳酸脱氢酶(LDH)。实验结束后处死动物,摘取动物心脏拭干后,称取心脏组织,测定丙二醛(MDA)及超氧化歧化酶(SOD),心肌组织病理学的病理形态改变,心肌细胞凋亡及相关蛋白Bc1-2,Bax的表达。 结果:1.血府逐瘀汤、活络效灵丹.桃红四物汤、丹参饮均能有效缓解缺血对心肌造成的损伤,使酶的外漏减少,CPK与LDH含量均低于缺血组,四组间比较无显著差异。而心肌缺血组及失笑散组CPK、LDH含量明显升高,与对照组比较差异显著,失笑散不能有效地使酶的外漏减少。2.血府逐瘀汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮均能显著提高缺血心肌组织SOD活性,同时降低MDA含量,以减轻脂质过氧化物损伤,四组间比较无显著差异。而失笑散不能有效减轻脂质过氧化物损伤。3.对照组无明显细胞变性与坏死,仅见极少量凋亡阳性细胞;心肌缺血组与失笑散组心肌细胞凋亡明显增多,心肌组织坏死;丹参饮组、血府逐瘀汤组、活络效灵丹组、桃红四物汤组心肌细胞凋亡及坏死均显著减轻。4.心肌缺血组与失笑散组细胞凋亡相关蛋白Bax表达明显增多,Bcl一2表达明显减少;丹参饮组、血府逐疥汤组、活络效灵丹组、桃红四物汤组与心肌缺血组及失笑散组比较,:润胞凋亡相关蛋白Bax表达明显减少,Bcl一2表达明显增多,存在显著差异,而四组间比较无显著差异。 结论:血府逐癖汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮能有效使酶的外漏减少,显著提高缺血』。肌组织SOD,舌性,同时降低MDA含量,以减轻脂质过氧化物损伤,有效促进相关蛋勺Bcl一2表达,抑制相关蛋白Bax表达,从而有效抑制心肌细胞凋亡及坏死,减轻心肌细胞损伤,对缺血心肌有保护作用。而失笑散对急性缺一如。肌无明显保护作用,这可 孟能与失笑散(((太平惠民和剂局方)))的组方特点有关。方中五灵脂和蒲黄均善入肝经血分,能通利血脉而散癖血但欠缺行气之功。血府逐癖汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮四组方均强调行气和活血并重,使气行则血行。既行血分癖滞,又解气分郁结,合而用之,使癖去气行。因此,血府逐疥汤、活络效灵丹、桃红四汤汤、丹参饮均能更有效的抑制心肌细胞凋亡及坏死,减轻心肌细胞损伤。同时,据本研究结果可推断血府逐疥汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮四组方之所以能有效治疗心血癖证,抑制缺血心肌细胞凋亡的发生和发展,是由于此四方能有效抑制酶的外漏,减轻脂质过氧化物损伤,清除自由基,促进细胞凋亡相关蛋白Bcl一2表达及抑制相关蛋白B以表达。从而达到对缺血心肌的保护作用,使心肌细胞凋亡减少。本实验通过观察各方作用间的差异,初步阐明五首活血化癖方对急性,衬肌缺血犬(心血癖证模型)细胞凋亡千预作用的机制,更好地提示中医治法方药的针对性,为该类药进一步深入研究和临床应用提供实验依据。-