【摘 要】
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T10c12-CLA是瘤胃微生物的氢化产物,是共轭亚油酸（CLA）的一种同分异构体,最初在反刍动物的肉和奶中被发现,在自然界以混合物的形式存在,动物体不能自身合成。其具有减少白色脂肪沉积、促进骨骼肌增长、降低乳脂合成、预防心血管疾病、抗癌等多方面的积极作用,已被美国FAD许可作为食品添加剂售卖。近年来大量文献表明,t10c12-CLA具有引起肝脏脂肪变性、改变葡萄糖稳态等副作用。而肝脏是动物体内复
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T10c12-CLA是瘤胃微生物的氢化产物,是共轭亚油酸（CLA）的一种同分异构体,最初在反刍动物的肉和奶中被发现,在自然界以混合物的形式存在,动物体不能自身合成。其具有减少白色脂肪沉积、促进骨骼肌增长、降低乳脂合成、预防心血管疾病、抗癌等多方面的积极作用,已被美国FAD许可作为食品添加剂售卖。近年来大量文献表明,t10c12-CLA具有引起肝脏脂肪变性、改变葡萄糖稳态等副作用。而肝脏是动物体内复杂的代谢反应中枢,承担着维持生命的重要作用。为了明析单一异构体t10c12-CLA对小鼠肝脏脂质代谢的影响,本次研究利用实验室前期构建的能自身合成t10c12-CLA的转基因小鼠模型（pai转基因小鼠）,对小鼠肝脏进行了以下研究。1内源性t10c12-CLA对小鼠肝脏表型的影响本研究在实验室前期构建的pai转基因小鼠模型的基础上,对其后代进行了繁育。将繁育得到的pai转基因小鼠后代作为材料,对其体重、肝脏重、肝脏脂肪酸组分以及肝脏形态组织学等表观指标进行了检测。结果发现:（1）转基因（Rosapai/pai、Rosapai/wt）小鼠肝脏表观颜色变黄、质脆,肝脏重量增加、肝体指数升高。（2）脂肪酸组分的检测结果显示,Rosapai/pai小鼠和Rosapai/wt小鼠肝脏中t10c12-CLA的含量分别为0.24%和0.20%,与野生型（WT）小鼠相比,呈显著性差异（p＜0.05）;此外,Rosapai/pai 和 Rosapai/wt 小鼠肝脏 C22:5 n3、C22:6 n3 等脂肪酸组分降低,n6/n3 升高。（3）石蜡组织切片染色结果显示,在雌雄小鼠中,与WT小鼠相比,Rosapai/wt小鼠出现大量的脂滴空泡;Rosapai/pai小鼠表现为脂滴减少,肝细胞结构发生变化,表现为肝脏气球样变性。综上可得t10c12-CLA改变了肝脏正常脂肪酸组分,致使肝脏重量增加,并引起了肝脏脂肪代谢的紊乱。2内源性t10c12-CLA对小鼠肝脏糖脂代谢的影响本部分研究依次对小鼠的血糖值,糖耐受（GTT）,肝脏甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）,以及肝脏糖脂代谢通路相关基因进行了检测,结果发现:（1）雌雄小鼠中,Rosapai/pai和Rosapai/wt小鼠的血糖值与WT小鼠相比无显著差异（p＞0.05）。（2）糖耐受结果显示,雄性小鼠中,Rosapai/pai和Rosapai/wt小鼠降低血糖值的速度低于WT小鼠,曲线下面积高于WT小鼠;雌性小鼠中Rosapai/wt小鼠降低血糖值的速度、曲线下面积始终高于WT小鼠,Rosapai/pai小鼠降低血糖值的速度与曲线下面积与WT小鼠相当。（3）肝脏中TG在雌性小鼠中呈现降低的趋势,在雄性小鼠中无明显差异;胆固醇的含量在雌雄小鼠中均没有明显的改变。（4）肝脏糖脂代谢通路相关基因的RT-qPCR结果显示,Rosapai/pai小鼠中 Pparγ、Ucp1、Glut4、Atgl、Cpt1α、Mcad、Pepck等相关基因显著性下调、Cgi58、Igf1基因显著性上调。结论:（1）内源t10c12-CLA引起了肝脏重量的增加、改变了肝脏正常脂肪酸组分,引起了小鼠肝脏脂肪变性。（2）内源t10c12-CLA引起了肝脏脂质代谢的紊乱,降低了雌性小鼠肝脏TG的合成,降低了部分糖脂代谢相关基因的表达。（3）内源t10c12-CLA对肝脏脂质代谢的影响存在性别差异和基因型差异。
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