C/EBPa基因在子宫颈癌组织和子宫颈癌细胞表达及意义的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:iror163
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目的:研究目的基因C/EBPα在新疆维吾尔族、汉族妇女子宫颈组织中蛋白质表达水平及临床意义,同时研究该基因在维吾尔族妇女子宫颈组织中mRNA表达水平及意义,并探讨C/EBPα基因pcDNA3.1重组体对子宫颈癌HeLa细胞存活状况和凋亡率的影响,为预防和治疗该肿瘤奠定基础。   方法:收集2008年1月至2009年4月石蜡包埋标本207例,其中慢性子宫颈炎组织95例,子宫颈鳞癌组织112例,采用免疫组织化学(S-P法)检测C/EBPα基因在子宫颈鳞癌组织和慢性子宫颈炎组织中的蛋白质表达水平。应用实时定量逆转录PCR方法检测5例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌及其癌旁子宫颈正常组织中C/EBPα基因mRN,A表达水平。构建C/EBPα基因pcDNA3.1真核表达载体,通过脂质体2000转染入子宫颈癌HeLa细胞,采用MTT法观察细胞存活状况及利用Annexin-Ⅴ/PI双染流式细胞法检测分析C/EBPα基因对子宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。   结果:(1)维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织中C/EBPα蛋白质相对于维吾尔族妇女慢性子宫颈炎组织中的蛋白质表达水平明显降低,两者比较有统计学差异(P<0.05);汉族妇女子宫颈鳞癌组织中C/EBPα蛋白质相对于汉族妇女慢性子宫颈炎组织中的蛋白质表达水平增高,两者比较有统计学差异(P<0.05)(2)通过卡方检验,分析C/EBPα蛋白表达与新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌的病理分级关系发现,C/EBPα蛋白表达与病理分级有关(P<0.05),通过Spearman秩相关检验,Spearman秩相关系数r=0.200,表明C/EBPα蛋白表达与维吾尔族妇女子宫颈鳞癌病理分级呈正相关;而汉族C/EBPα蛋白表达与病理分级无关(P>0.05)。(3)通过卡方检验,新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织的C/EBPα蛋白表达与临床分期有关(P<0.05),Spearman秩相关系数r=-0.269,表明C/EBPα蛋白表达与维吾尔族妇女子宫颈鳞癌的临床分期呈负相关:而汉族C/EBPα蛋白表达与临床分期无关(P>0.05)。(4)5例子宫颈鳞癌患者组织中C/EBPα基因的mRNA表达水平的最高值是4.79,最低值是1.90,平均表达水平为3.07±1.04。而5例相对应的癌旁正常子宫颈组织中mRNA的表达水平最高值为9.75,最低值为2.46,平均表达水平为5.63±2.98。经方差齐性检验,方差组间不齐,进行近似t检验,r=-3.15,p=0.006,表明维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织与相应癌旁正常子宫颈组织C/EBPα基因mRNA表达水平明显降低。(5)成功的构建了C/EBPα基因pcDNA3.1重组真核表达载体,将重组C/EBPα基因pcDNA3.1质粒、pcDNA3.1质粒导入子宫颈癌HeLa细胞,MTT实验发现重组C/EBPα基因pcDNA3.1质粒组细胞存活状况明显低于pcDNA3.1质粒和未转染HeLa细胞组,两者比较有统计学差异。Annexin-Ⅴ/PI双染流式细胞仪方法发现C/EBPα基因pcDNA3.1重组质粒组HeLa细胞凋亡率明显高于pcDNA3.1质粒组和未转染HeLa细胞组,两者比较有统计学差异。   结论:(1)C/EBPα基因在维吾尔族和汉族妇女子宫颈鳞癌组织中蛋白质表达水平明显降低。(2)新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织的C/EBPα蛋白质表达水平可能与病理分级呈正相关。(3)新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织的C/EBPα蛋白表达水平可能与临床分期呈负相关。(4)新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织C/EBPα基因的mRNA表达水平降低。(5)成功构建C/EBPα基因pcDNA3.1真核表达载体,通过真核转染实验,发现C/EBPα基因可以抑制HeLa细胞的生长,并促进其凋亡。
其他文献
本实验选择了抗碱盐生植物碱蓬(Suaeda g]auca)为实验材料,对其幼苗施加盐胁迫(150mM,NaCl:Na2SO4=1:1)或碱胁迫(150mM,NaHCO3:Na2CO3=1:1)。一方面监测碱蓬受胁迫后(0、2、4、8、16、24
学位
化工过程工业是国民经济基础工业之一。经过一系列化工过程的加工和生产,数以万计的化工产品得以投向市场,解决了人们日常生活的需求。近年来,随着经济全球化的发展,传统化工过程