小分子-蛋白复合物广泛地应用于半合成疫苗、抗体偶联药物、免疫分析等领域。同型双功能偶联剂是制备小分子-蛋白复合物的常用工具,其连接臂的两端具有相同的官能团,和小分子偶联后,以相同的官能团与蛋白上的活性位点反应。理想的偶联剂在与蛋白反应具有高反应活性的同时,也应该具备适当的稳定性。以己二酸为骨架的活泼酯是典型的同型双功能偶联剂。由于本身不具有免疫原性,被广泛用于合成疫苗的制备。常用的己二酸N-羟基琥珀酰亚胺酯由于N-羟基琥珀酰亚胺酯的高反应活性,和小分子连接后容易水解,降低与蛋白的偶联效率。而己二酸对硝基苯酚酯又体现出较高的稳定性,在一定程度上降低了氨基耦合速率。苯硒酚酯具有适当的反应活性和稳定性。本论文的主要研究工作如下:(1)系统研究苯硒酚酯的反应性和稳定性;(2)将己二酸二苯硒酚酯连接臂应用于抗肿瘤糖抗原(Tn、STn)、肿瘤肽抗原(MUC-5)、荧光染料(NBD)、尼古丁与蛋白复合物的制备;(3)对抗肿瘤糖疫苗STn-OVA进行免疫测试,该疫苗分子能成功激活免疫系统,实现IgM到IgG的抗体类型转换。本文的研究结果表明:己二酸苯硒酚酯温和条件下能将各类小分子与蛋白高效偶联,为疫苗合成及相关蛋白药物的设计提供了方法。