护卵汤对免疫性POF小鼠模型FoxP3蛋白表达的影响

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目的:初步探讨中药防治POF的作用和机理,为中药防治POF的提供理论和临床研究的实验数据,本研究运用现代科研方法,结合病理学和分子生物学知识,从免疫方面入手,初步探讨中药护卵汤对免疫性POF的作用机理。方法:1.采用文献检索方法,对中医药防治POF的病因病机、临床分型、治则治法以及当前研究进展进行研究分析。大量研究表明中药治疗卵巢早衰的疗效肯定,且副作用小和无耐药性,是值得深入探索的领域。2.根据POF的病理机制,用小鼠透明带ZP3第330-342个氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)为免疫原建立免疫性POF小鼠动物模型,并用护卵汤对其进行干预,运用光镜、流式细胞技术、免疫组化等技术检测卵巢形态的改变、CD4+CD25+Treg和FoxP3的表达及变化。结果:1.模型组:逐渐出现动情周期紊乱,时间相对较早,动情间期延长,阴道细胞涂片主要表现为大量白细胞及少量有核上皮细胞;卵巢体积缩小,成熟卵泡少,卵泡颗粒细胞层较正常减少,排列紊乱,部分卵泡发育不良,卵巢间质可见较多淋巴细胞及浆细胞浸润;外周血中AzpAb阳性,水平升高;卵巢重量、胸腺重量指数降低,脾重指数增加;CD4+CD25+Treg细胞数量减少;FoxP3的基因和蛋白表达均减弱。2.护卵汤组:POF小鼠较上述模型组的情况均有不同程度改善,高剂量组比中、低剂量组疗效明显,具体表现为:动情周期紊乱时间出现相对晚,主要表现为动情周期延长,动情期角化细胞减少,动情周期延长至8-10d;较模型组比较,卵巢体积稍增大,发育成熟卵泡较多。卵泡颗粒细胞层增多,少部分卵泡发育不良,卵巢间质见少量淋巴细胞及浆细胞浸润。外周血中AzpAb阳性,但水平明显降低;卵巢重量、胸腺重量指数明显升高;脾重指数明显降低;CD4+CD25+Treg细胞数量增加;FoxP3的基因和蛋白表达均增强。结论:POF的主要病因病机是肾虚胞阻,补肾通络是其基本治则;本实验建立的动物模型与人POF相接近,是研究POF较为理想的动物模型;护卵汤对免疫性卵巢早衰动物的卵巢功能、免疫功能具有一定改善作用。使卵巢重量指数明显增加,卵巢有生机卵泡增多,淋巴细胞和浆细胞浸润减少。性周期表现为有规律性,只是情间期延长;对POF的免疫功能具有调节作用。使胸腺重量指数上升,脾脏重量指数、AzpAb效价下降,CD4+CD25+Treg细胞数量增加,FoxP3的基因和蛋白表达均升高从而抑制自身免疫性损伤。
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