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鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)病是危害养鸭业的主要传染病之一,主要侵害2-7周龄的雏鸭,发病率和死亡率可达75%。临床上主要表现为困倦、下痢、共济失调,呈现典型的纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎和脑膜炎。多糖(Polysaccharide,PS)属于细菌的重要组成部分,其中荚膜多糖(Capsular Polysaccharide,CPS)对细菌抵抗外界环境压力和毒力具有重要作用,但其在鸭疫里默氏菌中的合成途径我们并不清楚。Wzx是参与CPS的合成的寡聚糖翻转酶,同时还参与了脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的合成,但两种合成途径有所差别。生物信息分析表明鸭疫里默氏菌B739-1128基因编码的蛋白WzxC可能参与荚膜多糖的合成,为近一步验证这项推测,我们进行了以下研究。首先,我们利用自杀性质粒pYA4278和同源重组技术构建了RA-CH-1 ΔwzxC缺失株,并利用RT-PCR和荧光定量PCR检测突变株中wzxC下游基因B739-]129和wzxL基因,表明wzxC基因缺失不会引起B739-1129基因和wzxL基因的表达量发生变化。随后,对亲本株和缺失株进行了生物学特性比较分析,包括表型特点、荚膜染色、生化特性、生长曲线,发现wzxC基因缺失后会引起细菌的荚膜减少,生长稳定期菌量降低；故随后对菌株进行了耐药性、耐干燥性、耐氧化性、血清耐受性的检测,以及对SPF鸡胚的毒力和对Vero细胞的黏附入侵能力检测,结果表明,wzxC基因缺失后,细菌的耐干燥性下降了、耐氧化性、耐血清杀菌能力下降明显,对SPF鸡胚的ELDso下降4.38个数量级,而黏附入侵能力分别上调3.05个数量级和2.26个数量级,初步表明wzxC参与了CPS的合成,且CPS对RA的黏附入侵能力中起抑制作用。最后,分别提取了RA-CH-1亲本株RA-CH-1 ΔwzxC缺失株的CPS和LPS,并进行SDS-PAGE和银染,浓硫酸-苯酚法测定CPS提取物中多糖的含量,结果发现wzxC缺失后,LPS变化不明显,而CPS则含量降低21.23%,且其中中、长链CPS条带消失,表明wzxC与CPS合成相关,而与LPS合成相关性不明显。总之,本次实验从生物信息学分析的角度上和实验性方法上证明了鸭疫里默氏菌B739-1128编码的WzxC蛋白参与了荚膜多糖的合成,这为研究鸭疫里默氏菌荚膜多糖和脂多糖的功能和合成途径奠定了新的基础,也为研究Wzx蛋白的功能及其功能特异性积累了素材。同时本次实验成功构建了RA-CH-1ΔwzxC这株毒力明显下降但仍能保持甚至提高其黏附入侵能力的缺失株,为研究鸭疫里默氏菌减毒疫苗株提供了思路和方向。