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目的 研究卷柏总黄酮对代谢综合征的干预作用及其急性毒性和长期毒性。
方法 卷柏总黄酮对代谢综合征大鼠糖脂代谢的影响及蛋白组学研究:雄性SD大鼠以高糖高脂饲料喂养,8周后以50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg卷柏总黄酮连续给药12周,观察卷柏总黄酮对代谢综合征大鼠血糖、血脂水平及对胰岛素和胰高血糖素调节的影响,提取大鼠肝脏蛋白并进行双向聚丙烯胺凝胶电泳分离,获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。通过 PDQuest 软件分别比较了正常组、模型组和给药组蛋白质凝胶电泳图谱的变化,确定了丰度发生两倍以上变化的差异表达蛋白点,经质谱分析和蛋白数据库搜索,获得差异蛋白点鉴定结果。
急性毒性实验:参照药物研究技术指导原则[1]对中药急性毒性实验的技术要求,将小鼠随机分为2组,给药组以8g·kg-1灌胃给予卷柏总黄酮,间隔6小时后再次给予同样剂量,空白对照组以相同的给药方法给予蒸馏水。测试一日内大剂量给药小鼠的毒性反应和死亡情况,并于给药7天后解剖测量体重、脏器指数,并观察脏器组织变化。
长期毒性实验:参照药物研究技术指导原则对中药长期毒性实验的技术要求,将大鼠随机分为4组,其中高、中、低剂量组分别以3g·kg-1、0.5g·kg-1、0.1g·kg-1连续灌胃给予卷柏总黄酮,空白对照组给予同体积蒸馏水。测定给药三个月、六个月及停药一个月大鼠的体重、血液学指标、血液生化学指标、脏器指数并进行组织病理学观察。
结果 卷柏总黄酮对代谢综合征大鼠糖脂代谢的影响及蛋白组学研究:给药后,卷柏总黄酮各剂量组均能降低代谢综合征大鼠的空腹血糖和血脂水平,并提升口服葡萄糖耐量,胰岛素、C-肽均有升高,胰高血糖素显著性降低。利用双向电泳技术,获得了293个蛋白点,选取其中5个蛋白点做比对, 发现模型组与正常组相比有2个基因表达产物呈现明显降低趋势、给药组与模型组相比有3个呈现明显增加的趋势,经质谱分析和蛋白数据库搜索,获得了1个差异表达蛋白点鉴定结果,确定该蛋白为肌动蛋白。
急性毒性实验:小鼠一日内给药量为16g/kg,灌胃后小鼠未见死亡,7天后解剖主要脏器未见明显病理改变;主要脏器指数与对照组比较无显著性差异。
长期毒性实验:大鼠给药三个月、六个月、停药一个月主要血液学指标、主要生化学指标与空白对照组比较无显著性差异( P>0. 05) ,解剖主要脏器未见明显病理改变,观察组织切片无明显异常;主要脏器指数与对照组比较无显著性差异。
结论 卷柏总黄酮对代谢综合征所表现的糖脂代谢异常均有改善,对糖耐量特别是餐后血糖具有较好的控制作用。其作用可能与调节胰岛素和胰高血糖素分泌而间接实现的。利用双向电泳技术,获得了 293个蛋白点,通过比对其中5个蛋白点,经质谱检测确定了其中一个差异蛋白为肌动蛋白。
卷柏总黄酮单次大剂量口服对机体无明显毒性,其最大给药量为16g/kg。根据提取率换算相当于 1776g/kg.
卷柏总黄酮长期服用对机体无明显毒性,日常行为活动无影响,对机体的肝肾功能、造血功能、免疫力和正常代谢均无影响,对主要器官的组织形态无影响。说明卷柏总黄酮是一种安全性较高的中药。