超声辐射微泡剂抑制Balb/c裸鼠SMMC-7721移植瘤的实验研究

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目的建立SMMC-7721系肝癌Balb/c裸鼠移植瘤模型,研究低频超声辐射微泡剂对裸鼠SMMC-7721移植肿瘤体积增长抑制情况和肿瘤组织病理学变化,观察肿瘤局部SOD浓度,CD105表达情况和MVD的数量,研究肿瘤体积增长率和SOD,MVD之间的相关性。并初步探讨产生该结果的可能机制。方法调整SMMC-7721肝癌细胞浓度至5×106/ml,于每只裸小鼠左侧皮下注射0.2 ml建立SMMC-7721系肝癌Balb/c裸鼠移植瘤模型;模型建立成功后,50只裸鼠随机分为五组,对照组(A),单纯微泡组(B),单纯超声组(C),超声辐射微泡隔日组(D),超声辐射微泡每日组(E),每组10只模型裸鼠。各组采用相应的处理方法后,连续一周测量各组肿瘤体积大小,计算肿瘤体积增长率并绘制肿瘤体积增长曲线;取瘤体标本,石蜡切片后,HE染色电子显微镜下观察各组肿瘤组织病理学损伤;应用免疫组化的方法分析局部氧自由基代谢产物SOD浓度变化;并分析增长率与SOD浓度之间的相关性。同样用免疫组化法,观察各组肿瘤中CD105表达的差异,并由此对各组肿瘤微血管(MVD)进行计数,并分析MVD与肿瘤体积增长率之间的相关性。结果SMMC-7721肝癌细胞种植后第二周可于Balb/c裸小鼠皮下触及瘤结节。经相应处理一周后,各组间肿瘤体积大小各异(cm3):A组(0.207±0.081)、B组(0.216±0.019)、C组(0.180±0.015),A组肿瘤体积较D组(0.139±0.029)和E组(0.122±0.025)明显增大,(P<0.05);而A、B、C组间以及D、E组间则无统计差异。肿瘤体积增长率(%)的比较发现:D组(73.20±0.138),E组(57.24±0.1653)肿瘤体积增长率明显低于对照的A组(121.24±0.347)、B组(123.13±0.232)、C组(108.74±0.221),(P<0.01)。D和E组间无统计学差异,A、B和C组之间也无统计学意义。病理学检查见D,E组的瘤体标本内可见明显的血栓形成和大片梗死。免疫组化法得出局部SOD阳性率(%):D组(28.83±2.483)、E组(32.50±3.017)均高于A组(11.50±2.881),(P<0.01)而A、B、C组间以及D、E组间则无统计差异。并且SOD阳性率与肿瘤生长率间成负相关,(r=-0.663)。CD105免疫组化结果显示,A组、B组和C组的染色阳性较D组和E组明显增多,MVD计数结果显示:A组(64.6±2.03)、B(68.0±1.32)组和C(59.3±1.21)组比D(31.3±1.21)组和E(28.1±0.81)组显著增高,D,E两组与A组相比,具有统计学意义,(P<0.01)。A组、B组、C组间无统计差异,D组和E组间也无统计差异,MVD与肿瘤体积增长率之间成正相关(r=0.576)。
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