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目的:淋巴瘤是血液系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病机制尚不清楚,诊断上以组织活检作为确诊标准,而淋巴瘤早期小病灶或位于体内的深部病灶组织活检检出率较低,给临床诊断带来困难。目前其基本治疗策略是以化疗为主的化、放疗结合的综合治疗。我们应用SELDI-TOF-MS技术对体外培养的人T、B淋巴瘤细胞株和正常淋巴细胞的蛋白进行检测,通过Proteinchip software收集数据,并应用SPSS 13.0统计软件包对数据进行分析,以寻找淋巴瘤细胞和正常淋巴细胞的差异蛋白及不同来源淋巴瘤细胞间的差异蛋白。体外培养的细胞株虽然不能完全反映体内细胞的生长状态和生物学活性,但它具有成分单一、均质性好、实验条件容易控制等优点,通过实验期望为寻找淋巴瘤的分子标志物并进而为研究淋巴瘤的发病机制和寻找治疗靶位打下初步基础,并为其早期诊断提供帮助。方法:常规培养人T、B淋巴瘤细胞株于含10%小牛血清的RPMI 1640培养基的25ml培养瓶中,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,每3～5天传代一次,取对数生长期的细胞作实验,将两种细胞分别接种于6孔培养板中继续培养,于接种2、4、6天后分别收集细胞,每个时间段设3个复孔,并使用淋巴细胞分离液从正常人外周血中分离出淋巴细胞接种于6孔培养板中培养于含10%小牛血清的RPMI 1640培养基中,培养基中另加入100ug/ml的植物血凝素,同样于接种2、4、6天后分别收集细胞,每个时间段设3个复孔,使用蛋白提取液分别提取各孔细胞的总蛋白,并在收集细胞前各取少许淋巴瘤细胞培养液上质谱检测,应用表面增强激光解吸-离子化-飞行时间质谱技术进行检测,用CM10芯片获得蛋白表达指纹图谱,并通过Proteinchip software收集数据,实验重复三次,得到的数据应用SPSS 13.0统计软件包进行初步的统计学分析(计算均值?X、标准差S和P值),P<0.05被认为差异有统计学意义。结果:1. T淋巴瘤细胞株与正常淋巴细胞比较有6个差异表达蛋白质荷比峰(P<0.05),有5个蛋白质峰在T淋巴瘤细胞株中高表达,1个蛋白质峰低表达。2.B淋巴瘤细胞株与正常淋巴细胞比较有6个差异表达蛋白质荷比峰(P<0.05),有4个蛋白质峰在B淋巴瘤细胞株中高表达,2个蛋白质峰低表达。3. T淋巴瘤细胞株和B淋巴瘤细胞株有共同的相对于正常淋巴细胞高表达和低表达的蛋白质荷比峰。4.不同培养时间T淋巴瘤细胞株的蛋白表达无显著差异(培养时间较短时)。5.不同培养时间B淋巴瘤细胞株的蛋白表达无显著差异(培养时间较短时)。6. T淋巴瘤细胞株与B淋巴瘤细胞株比较有7个差异表达蛋白质荷比峰(P<0.05),相对于B淋巴瘤细胞株而言,有3个蛋白质峰在T淋巴瘤细胞株中高表达,4个蛋白质峰低表达。结论:1.T、B淋巴瘤细胞与正常淋巴细胞比较蛋白质组学水平均有显著差异。2. T、B淋巴瘤细胞间的蛋白质组学水平有显著差异。3.同种的淋巴瘤细胞株在不同培养时间的蛋白质组学水平无显著差异(培养时间较短时)。4.应用SELDI-TOF-MS技术可能对筛选淋巴瘤的分子标志物有重要价值,并可能为研究淋巴瘤的发病机制和寻找治疗靶位打下初步基础,并为其早期诊断提供帮助。