化学处理和热处理联合使用对马铃薯PVY病毒脱除效果的研究

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马铃薯(Solanum tuberosum L.)是一种重要的粮食农物,其通过营养器官块茎进行无性繁殖的方式致使病毒积累而导致品种退化,这已成为限制马铃薯产量的主要因素。为了生产无病毒的马铃薯种薯,现已研发了多种用于体外消除病毒的方法,如单独使用分生组织培养,或者结合使用热处理、电处理、冷冻处理和化学处理等技术。影响马铃薯病毒脱除效率的主要因素有品种类型、抗病毒剂、病毒类型和热处理时间等。高效准确的病毒检测方法目前主要有酶联免疫吸附测(ELISA)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等。为了研发高效的马铃薯PVY病毒脱除方法,本研究以感染了马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)的品种“费沃瑞它”的组培苗为材料,采用不同浓度的化学试剂和热处理联合使用的脱病毒处理方法,通过检测不同处理方法对组培苗营养生长和病毒脱除效果的影响,筛选有效的脱除马铃薯PVY病毒的方法。得到以下实验结果:(1)使用RT-PCR和qPCR方法检测马铃薯病毒PVY,确认马铃薯品种“费沃瑞它”组培苗感染了PVY病毒。(2)感染了病毒的马铃薯组培苗单茎节在继代培养中,经15mg/L、20mg/L利巴韦林处理3周,然后经37℃处理1周后,与对照相比,组培苗的营养生长并未发生显著差异;但经20mg/L利巴韦林处理3周,然后经37℃处理2周后,组培苗的营养生长有了明显的改善,组培苗的高度、每株的节数、节间长度和每株根数均显著增加。由此初步表明,20mg/L利巴韦林和37℃热处理2周联合使用,可显著抑制PVY病毒对马铃薯营养生长的影响。(3)经qPCR检测发现,经不同浓度的化学试剂利巴韦林处理和热处理联合使用后,马铃薯组培苗中PVY病毒的表达量略有减低,但与对照相比,PVY基因表达量差异不显著。由此表明,不同浓度利巴韦林和热联合处理,仅抑制了病毒的生长,并未完全脱除病毒。本研究结果将为降低马铃薯组培苗PVY病毒对马铃薯组培苗生长的抑制提供理论和技术支持。
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