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缺血性中风属中医“络病”范畴,络病以络脉为依托而发生,包括气络和血络,从脑络的生理功能可以看出,脑络流动具有双向性的特点,既能使络脉中的气血散布于脏腑组织之中,又可以将散布于脏腑组织的气血渗入络脉。从这个功能特点角度来看,我们推测,脑络的功能实现并非依赖于单一的微循环结构,而是以微循环为核心,由微血管与周围实质细胞共同组成的功能单位,这个功能单位中的组织细胞之间通过互递信息,相互协调,共同实现脑络灌渗血气、交通营卫的生理功能。在生理、病理状态下,脑微血管内皮细胞(3rain Microvascular Endothelial Cells, BMEC)和星形胶质细胞(astrocyte, AS)之间存在着密切的功能联系,它们可能通过细胞间信息通讯分子传递互相影响,形成了一个复杂的新系统——即所谓的“内皮-胶质细胞信息网络”,这个系统中的血管内外双向的信息传递和对大脑内环境的维持与中医脑络灌渗气血、交通营卫的功能不谋而合。因此,通过研究“内皮-胶质细胞信息网络”的变化特征以及内在机制为物质载体,将有望对脑络功能发挥的科学内涵予以揭示。目的：以“内皮-胶质细胞信息网络”为中医络脉功能的物质载体,揭示脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞生理、病理及通络救脑注射液处理后不同状态的培养液对彼此的影响特征,从血脑屏障稳定性的维持,神经营养因子的分泌及炎症反应等角度,探讨脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞的生物学关系。为进一步阐释络脉的科学内涵以及通络救脑注射液通过内皮细胞和星形胶质细胞调节脑内微环境理论假说提供新的证据。方法：1.采用原代取材方法获得大鼠脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞,进行培养、纯化和传代。采用氧糖剥夺的方法进行细胞拟缺血损伤模型的建立。2.通过氧糖剥夺时间的不同,MTT法检测内皮细胞和星形胶质细胞的活性,根据结果确定造成两种细胞激活和损伤的造模时间,并通过westen blot方法,对两种细胞正常、激活、损伤三个时间点进行分析。3.收集内皮细胞5种条件培养液,即①正常组②激活组③激活加药组④损伤组⑤损伤加药组,以相同方法收集星形胶质细胞5种条件液。4.将5种星形胶质细胞细胞条件培养液分别作用于损伤的脑微血管内皮细胞：①采用MTT法检测细胞活性。②微量酶标仪法和上机比色法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)、Y-谷氨酰胺转肽酶(γ-glutamyle transpeptidase, γ-GT)的活性。③ELISA方法检测内皮细胞IL-1β、TNF-α的表达。5.将5种脑微血管内皮细胞条件培养液分别作用于损伤的星形胶质细胞：①采用MTT法检测细胞活性。②westen blot方法检测星形胶质细胞BDNF、GDNF的表达。结果：1.通过MTT方法检测,脑微血管内皮细胞氧糖剥夺0.5h出现激活状态,6h出现严重损伤。星形胶质细胞氧糖剥夺2h出现激活状态,8h出现严重损伤。Westen blot方法分析上述时间点确立。2.星形胶质细胞条件培养液能增强受损脑微血管内皮细胞活性,同时可增强损伤内皮细胞内血脑屏障特征性酶即Y-GT、AKP的活性,抑制损伤的内皮细胞IL-1β、TNF-α的表达,但随着星形胶质细胞的损伤,其条件培养液的上述作用效果减退甚至消失。通络救脑注射液作用后,星形胶质细胞条件培养液的上述作用效果增强。3.脑微血管内皮细胞条件培养液能增强受损星形胶质细胞活性,同时可增强星形胶质细胞内BDNF、GDNF的表达,但随着内皮细胞的损伤,其条件培养液的上述作用效果减退甚至消失。通络救脑注射液作用后,脑微血管内皮细胞条件培养液的上述作用效果增强。结论：1.脑缺血发生后,AS可以协助维持血脑屏障的稳定,AS的这一作用是通过旁分泌的方式,作用于BMEC,增强BMEC活性,诱导BMEC内血脑屏障特征性酶表达来实现的,且正常状态下的AS对BMEC功能的诱导程度强于对其活性的诱导程度；同时AS还可以通过对BMEC的作用,抑制脑缺血时爆发的炎症级联反应,减轻局部脑水肿,但随着AS的活化以及完全受损,上述作用下.降乃至消失。2. BMEC可以通过旁分泌的方式,增强AS活性,且在脑缺血损伤后,可通过促进AS分泌神经营养因子的途径,间接实现对神经元的保护作用。但随着BMEC的活化以及完全受损,上述作用下降乃至消失。3. BMEC和AS不但在解剖结构上联系紧密,在功能上,通过细胞间信息通讯分子传递互相影响,形成了一个复杂的“内皮-胶质细胞信息网络”系统,这个系统具有传递血管内外双向信息的作用,将神经元的保护与脑血管的保护联系起来,通过庞大的脑内网络系统互相影响,维持整个大脑微环境稳态。4.通络救脑注射液既可以直接作用于BMEC和AS,也可以影响两种细胞的相互作用,在脑缺血后可提高受损细胞活性,稳定血脑屏障,促进神经营养因子的分泌,抑制炎症反应,可通过多靶点、多途径改善脑内微环境,保护神经元。5.“内皮-胶质细胞信息网络”系统在生理和病理状态下,通过旁分泌的方式,信号传递,共同构成了神经元生存的微环境,通过调节脑缺血后各种细胞因子的紊乱,对大脑内部的网络系统进行调控,从功能特点的角度,较好地阐释了络病的物质基础,指导络病的临床治疗。