小麦TaPP2C01和tae-miR9674a抵御干旱和盐分胁迫功能研究

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提高植株抵御干旱、盐分等渗透胁迫能力,能有效减轻作物逆境伤害,提高作物产量和品质。本研究采用遗传转化技术建立了小麦耐逆因子TaPP2C01和tae-miR9674a转化株系,对上述因子抵御渗透胁迫功能进行了研究。主要结果如下:1.小麦蛋白磷酸酶基因TaPP2C01 cDNA全长855bp,编码284个氨基酸,保守结构域位于aa 28-aa 274之间。TaPP2C01为亲水碱性蛋白,等电点为4.93,含有参与蛋白磷酸化的丝氨酸/苏氨酸位点,同时也具有酪氨酸磷酸化潜在功能。TaPP2C01编码蛋白定位在细胞质膜与细胞核,表明TaPP2C01在上述亚细胞位置执行特定生物学功能。2.TaPP2C01转录本在干旱和盐分胁迫下上调,表明该小麦磷酸酶基因参与植株对上述逆境的响应过程。3.干旱和盐分胁迫下,与野生型对照(WT)相比,正义表达TaPP2C01株系长势较好,根长、叶面积、单株干鲜重增加,叶绿素相对含量(SPAD值)、净光合速率(Pn)、光合电子传递效率(ΦPSⅡ)和最大光能转化效率(Fv/Fm)提高,非光化学淬灭系数(NPQ)降低。表明正义表达TaPP2C01通过改善光合器官功能,增强植株抵御干旱和盐分渗透胁迫能力。4.小麦种属miRNA成员tae-miR9674a转录本则在干旱胁迫下表现上调,且胁迫后各处理时间点表达量均高于处理前水平。tae-miR9674a作用靶基因包括丝氨酸/苏氨酸蛋白(BQ620679)、Aux/IAA1生长素早期响应基因(TC409206)、RuBP活化酶 A(TC409957)、TRAP二羧酸转运蛋白(CK200132)、肽酶 S16(TC370627)和氨基甲酰磷酸合成酶小亚基(CD897903)等不同家族成员。5.干旱处理下,与WT相比,正义表达tae-miR9674a株系细胞保护酶SOD、POD、CAT活性增强,膜质过氧化产物MDA含量降低,叶片H2O2和O2-累积量减少、气孔关闭速率加快、叶片失水率降低,可溶性糖、可溶性蛋白以及脯氨酸含量增加。与此相反,该miRNA反义表达株系细胞保护酶SOD、POD、CAT活性减弱,膜质过氧化产物MDA含量和细胞活性氧数量增加,气孔关闭速率减慢、叶片失水率提高,渗透物质累积量减少。表明tae-miR9674通过对上述逆境生理生化过程调控,增强植株对干旱胁迫的适应。综上,TaPP2C01与tae-miR9674a在介导植株抵御渗透胁迫中发挥重要正向调控作用,上述小麦耐逆因子可作为小麦种质和节水栽培实践的植株耐逆能力评价重要分子指标。
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