论文部分内容阅读
实验目的建立小鼠血清中弓形虫Peroxiredoxin抗原的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。用此法检测人血清中弓形虫Peroxiredoxin抗原,进行人群弓形虫病血清流行病学调查。实验方法第一部分：应用棋盘滴定方法选择适宜的被检血清浓度、抗体浓度及酶标二抗浓度。观察封闭液对实验结果的影响,并绘制蛋白定量标准曲线。对30份感染弓形虫小鼠血清及30份正常小鼠血清进行间接ELISA检测,评价该方法的检测效果。测定其敏感度、特异性及重复性。第二部分：采用整群抽样的研究方法,在神池县城和神池农村,各抽取一个居民小组居民作为研究对象。采集1021份空腹静脉晨血,用间接ELISA法检测人血清中弓形虫Peroxiredoxin抗原。实验结果被检血清最适包被浓度为1：50,大鼠抗弓形虫血清最佳稀释度为1：100(实际效价1：128),辣根酶标记山羊抗大鼠IgG的最适稀释度为1：4000。封闭液对实验结果的影响不大。该方法敏感度高、重复性好、特异性强,检测30份弓形虫感染小鼠血清的检出率为100%。不同年龄组人群血清弓形虫IgG抗体阳性率不同,差异无统计学意义(χ2趋势=4.195,P=0.522)。不同性别人群血清弓形虫IgG抗体阳性率不同,差别无统计学意义(χ2=0.000,P=0.990)。不同文化程度人群血清弓形虫IgG抗体阳性率不同,差异无统计学意义(χ2趋势=6.322，P=0.097)。不同职业人群血清弓形虫IgG抗体阳性率不同,差异无统计学意义(χ2趋势=8.584,P=0.284)。调查1021人中,未养犬和猫者弓形虫IgG抗体阳性率低于养犬者和养猫者,差异有统计学意义(χ2=13.157,P=0.004)。有吃生鸡蛋习惯者弓形虫IgG抗体阳性率高于无吃生鸡蛋习惯者,差异有统计学意义(χ2=8.417,P=0.004,)。经常生吃蔬菜和不洁瓜果者弓形虫IgG抗体阳性率高于偶而有该习惯者和无此习惯者,差异有统计学意义(χ2=12.201,P=0.002)。调查1021人中,加工生肉与熟食所用刀板经常不分者血清弓形虫IgG抗体阳性率高于偶尔不分者和从不混同使用者,差异有统计学意义(χ2=9.767,P=0.008)。经常接触泥土者弓形虫IgG抗体阳性率高于偶而接触和从未接触泥土者,差异有统计学意义(χ2=13.753,P=0.001)。饭前便后洗手做到每次或经常洗者弓形虫IgG抗体阳性率低于偶尔或从不洗者,差异有统计学意义(χ2=43.125,P<0.001)。特殊人群弓形虫IgG抗体阳性率分别为：临床免疫功能低下者为20.00%,献血员17.85%,屠宰人员和生肉销售者27.78%,其中屠宰人员和生肉销售者弓形虫IgG抗体阳性率最高,差异无统计学意义(χ2=1.012,P=0.603)。结论建立了小鼠血清中弓形虫Prx抗原的间接ELISA法。该方法敏感、特异、稳定,可适用于弓形虫病的诊断及流行病学调查。成功应用ELISA法检测人血清中Peroxiredoxin抗原并应用于血清流行病学研究。