鼻饲营养品是一类氨基酸含量较高且成分复杂的特殊医用配方食品,对其中氨基酸含量进行研究,即可为临床上量化营养支持效果和生产上进行产品质控提供方法,也可为进一步完善相关标准提供参考。本研究通过对衍生条件和色谱条件进行优化,成功建立了鼻饲营养品中21种氨基酸的高效液相分析方法。采用异硫氰酸苯酯(PITC)作为衍生剂,通过对衍生剂用量、萃取剂用量、衍生化反应时间和衍生化反应温度参数进行优化;衍生剂用量为1.0mL,萃取剂用量为4.0mL,反应时间为60 min,反应温度为室温时,氨基酸衍生化效果理想,且衍生物在48 h内保持稳定。通过对流动相、洗脱程序、色谱柱、峰型优化剂、柱温和流速等因素进行优化,流动相A为10 mmol/L磷酸缓冲液,流动相B为乙腈/甲醇/水(45/45/10),色谱柱为InertSil ODS-3(3.0 mm×100 mm,3μm),优化剂为0.15%三乙胺,柱温为40℃,流速为1.0 mL/min时,30 min内即可获得理想的氨基酸分离效果。方法学验证表明,21种氨基酸在0.01-20.0μmol/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.002-0.038μmol/L。在高、中、低三个添加水平下,方法重复性良好,分离效果理想。使用已建立的高效液相分析方法,对经前处理后的鼻饲营养品样品进行氨基酸含量测定。前处理方面,首先使用聚乙二醇/乙醇溶液(40/60)80 mL作为蛋白沉淀剂,然后建立阳离子交换树脂法对氨基酸进行分离纯化。当上柱液pH值为2.5,上柱液体积小于115 mL,流速为3柱体积/小时,洗脱液为3%氨水80 mL时,不同含量水平下21种氨基酸的回收率为62.48%-82.79%,回收效果理想。经前处理的样品测定结果表明,不同来源的4组样品中氨基酸含量差异明显。其中石药集团样品中氨基酸含量最为丰富;科室自配和东泽特医样品中氨基酸含量均衡,产品针对性强;恩特纽健样品中氨基酸含量较低且各氨基酸浓度不均衡。综上所述,本研究建立的鼻饲营养品中21种氨基酸含量测定方法具有线性范围广泛、重复性良好、回收率理想和定量准确等特点,可为产品质控和相关标准的制订与更新提供参考。