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鼠曲草(Gnaphlium affine D.Don)为两年生草本植物,是我国生长广泛,是药食兼用的野生蔬菜。虽鼠曲草被食用的历史悠久,对其研究并不深入。本文研究了微波辅助提取法提取鼠曲草黄酮的方法和工艺,用大孔树脂对黄酮类化合物进行纯化,并对黄酮类成分进行成分分析及体外抗氧化性研究。
课题对鼠曲草黄酮的研究包括四个部分:
(1)对鼠曲草总黄酮的提取工艺进行了研究。采用微波辅助提取法,提取了鼠曲草中的黄酮类化合物。结果表明:微波功率500 W时,微波提取的最佳工艺为乙醇浓度50%(V∶V)、料液比1∶60(g∶mL)、温度60℃、时间6 min,在此条件下黄酮得率为4.63%。
(2)以鼠曲草黄酮的吸附率、解吸率为指标,考察了六种大孔吸附树脂对鼠曲草中总黄酮的纯化性能,筛选出最佳的大孔吸附树脂,采用动态法研究了吸附流速、pH条件、解吸液乙醇浓度和解吸液流速对吸附解吸的影响,同时采用高效液相色谱法进行分析检测表征了纯化的效果。实验结果表明,大孔吸附树脂AB-8对鼠曲草总黄酮有很好的吸附和解吸性能,并确定了最佳的吸附和解吸条件为:样品液pH=4.0、吸附流速为2BV/h、解吸液乙醇浓度为50%、解吸流速为2BV/h。树脂饱和吸附量为14.7mg/g湿树脂,在此条件下鼠曲草黄酮纯度由原来的28.0%提升到59.4%。
(3)采用高效液相色谱-串联质谱法对鼠曲草黄酮进行定性及定量分析,与标准品比对确定了九种成分,他们分别是奎宁酸(1073.12μg/g)、绿原酸(2144.46μg/g)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(4957.33μg/g)、木犀草苷(66.38μg/g))、金丝桃苷(486.44μg/g)、芹菜素-7-葡萄糖苷(327.34μg/g)、紫云英苷(777.21μg/g)、槲皮素(71.58μg/g)、木犀草素(883.69μg/g),并推测出两种成分,分别为野黄芩苷和槲皮素-3-半乳糖-4-葡萄糖苷。
(4)对鼠曲草黄酮的总抗氧化活性进行研究,并与常见的抗氧化剂Vc进行了比较。得出鼠曲草黄酮在总抗氧化能力、清除超氧阴离子自由基的能力、清除DPPH自由基的能力方面略低于抗氧化剂Vc,但在清除羟自由基的能力和抑制Fe2+诱发卵黄脂蛋白过氧化的能力上鼠曲草黄酮强于Vc。