黑曲霉分解难溶性磷酸盐的强化研究

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我国农业土壤缺磷现象严重,已成为我国农业生产的重要限制因素。微生物在自然界磷的循环中发挥着重要作用,自然界中存在大量具有解磷作用的微生物,包括细菌和真菌等。这些微生物能将土壤中难溶性磷转化为可溶性磷,从而使土壤中磷的利用率大大提高。本文以黑曲霉分解难溶性磷酸盐为主线,研究了不同培养条件下黑曲霉对难溶性磷酸盐分解的强化,以期为提高土壤中磷的利用效率和修复土壤环境提供理论依据和技术支持。具体研究结果如下:1.液体培养条件下不同添加剂对黑曲霉生长及产酸的影响分别考察了赤霉素、α-萘乙酸、芸香叶苷、酵母浸粉及甲醇对黑曲霉生长及产酸的影响。结果表明,除了甲醇以外,赤霉素、α-萘乙酸、芸香叶苷、酵母浸粉在一定浓度下对黑曲霉的生长、培养液p H的降低以及可滴定酸浓度的提高均具有一定的促进作用。高效液相色谱(HPLC)分析结果表明,赤霉素能够促进黑曲霉分泌葡萄糖酸和草酸;α-萘乙酸能够促进黑曲霉分泌柠檬酸和草酸;芸香叶苷能够促进黑曲霉分泌柠檬酸和草酸;酵母浸粉能够促进黑曲霉分泌草酸。除α-萘乙酸外,赤霉素、芸香叶苷及酵母浸粉均能够提高培养液中酸性磷酸酶活性,而中性磷酸酶和碱性磷酸酶活性未检测到。2.液体培养条件下四种添加剂对黑曲霉分解难溶性磷酸盐的影响以磷酸钙、磷酸铝、磷酸铁以及高磷铁矿和磷矿作为难溶性磷酸盐的代表,研究了赤霉素、α-萘乙酸、芸香叶苷和酵母浸粉对黑曲霉分解难溶性磷酸盐的影响,结果表明,在一定的浓度下,四种添加剂均能促进黑曲霉对磷酸钙、磷酸铝、磷酸铁的分解,但芸香叶苷和酵母浸粉对黑曲霉分解磷酸铝的促进效果不是很明显。该四种添加剂均能够显著促进黑曲霉对高磷铁矿中磷的脱除,其中酵母浸粉的效果最好。四种添加剂中,酵母浸粉能够明显的促进黑曲霉对磷矿粉的分解,但其他三种添加剂则没有明显的促进作用。3.固体培养条件下黑曲霉对难溶性磷酸盐的分解分别以玉米粉、玉米秸秆、小麦秸秆和麦麸作为固体培养基,研究了固体培养条件下黑曲霉的生长及对难溶性磷酸盐的分解作用。结果表明,黑曲霉在这四种固体培养基中均能生长良好,且能有效分解难溶性磷酸盐。HPLC分析结果表明,其主要发酵产生的有机酸为草酸,另外也有少量的其他有机酸。研究了不同固体培养基中黑曲霉分解磷矿粉的最佳工艺条件。结果表明,在玉米秸秆培养基中黑曲霉分解磷矿粉的最佳工艺条件是:培养时间4 d,料水比1:5(m:m),磷矿粉质量2.0~2.5 g,培养基质量8 g;在小麦秸秆培养基中黑曲霉分解磷矿粉的最佳条件是:培养时间4~5 d,料水比1:4(m:m),磷矿粉质量1.5~2.0 g,培养基质量8 g;在麦麸培养基中黑曲霉分解磷矿粉的最佳条件是:培养时间4~5 d,料水比1:2(m:m),磷矿粉质量2.5 g,培养基质量12 g。
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