论文部分内容阅读
目的:观察用甘丙肽受体2(GALR2)特异性拮抗剂M871阻断GALR2的条件下,2型糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)含量及膜位移的变化,以了解GALR2在调节糖尿病动物葡萄糖摄取能力和胰岛素敏感性方面的作用。方法:从6周龄雄性健康SD大鼠中随机抽取20只,平均分成2组:健康运动对照组与健康安静对照组,喂以标准普通饲料。其余大鼠在喂饲高糖高脂膳食6周的基础上,腹腔注射小剂量的链脲佐菌素(Streptozocin , STZ),建立2型糖尿病大鼠模型。将2型糖尿病大鼠随机分成4组:运动M 871组、安静M 871组、运动对照组和安静对照组。每组各10只,继续喂饲高糖高脂饲料。运动组大鼠每天进行60min无负重游泳,游泳前用药组注射M871 3μmol/kg/d,对照组注射生理盐水0.3mL/d,连续20天。实验期间,每周测大鼠体重。实验结束后用快速血糖仪测定空腹血糖,ELISA法测定血清胰岛素浓度、甘丙肽浓度和骨骼肌匀浆液中GLUT4含量,高胰岛素-正葡萄糖钳法了解大鼠胰岛素敏感性,Western blot法了解大鼠骨骼肌匀浆液中GLUT4含量及转位情况,Real-time PCR法检测骨骼肌细胞中GLUT4 mRNA的表达量。结果:两糖尿病M871组与相应的糖尿病对照组相比,大鼠血糖升高(P<0.05),葡萄糖输注速率显著降低(P<0.01),骨骼肌细胞外膜的GLUT4含量降低(P<0.05)。而两糖尿病运动组与相应的糖尿病安静组相比,大鼠血糖和血清胰岛素浓度降低(P<0.05),葡萄糖输注速率显著升高(P<0.01),血清甘丙肽浓度升高(P<0.05),匀浆液GLUT4水平和GLUT4 mRNA表达量也显著增高(P<0.01)。结论:M871升高糖尿病动物血糖,降低胰岛素敏感性和骨骼肌摄取葡萄糖的能力,而它对骨骼肌细胞GLUT4蛋白总量没有显著影响,提示内源性甘丙肽可能通过激活GALR2,增加GLUT4膜转运量而提高胰岛素敏感性。运动可以通过增加GLUT4由细胞内膜向细胞外膜的转运,或提高GLUT4活性而提高胰岛素敏感性,降低动物血糖。本实验结果表明GALR2有望成为2型糖尿病治疗的新靶点。