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目的:通过研究系统性红斑狼疮(SLE)、系统性硬皮病(SSc)和皮肌炎(DM)患者CD4+T细胞中整体基因组DNA甲基化状态以及甲基化相关调控基因表达,从而探讨结缔组织病的表观遗传学改变。方法:(1)密度梯度离心分离正常人、病人的外周血单个核细胞,磁珠分离CD4+T细胞;(2)试剂盒提取RNA和DNA;(3)整体甲基化定量试剂盒检测CD4+T细胞中整体基因组DNA甲基化水平;(4)实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR)检测DNA甲基转移酶(DNMT)和甲基结合蛋白(MBD)的mRNA的表达。结果:(1)与正常对照组相比,SLE和SSc患者CD4+T细胞中均表现出明显的整体基因组DNA低甲基化(P=0.013,P=0.039),活动性与非活动性SLE患者之间整体基因组DNA甲基化水平无明显差异(P=0.927);DM患者CD4+T细胞整体基因组DNA甲基化水平与正常对照相比无显著差异(P=0.589)。(2)SLE患者CD4+T细胞中DNMT1及MBD4的mRNA水平较对照组相比明显降低(P=0.001,P=0.008),MBD2及MeCP2的mRNA水平明显升高(P=0.008,P=0.027):SSc患者CD4+T细胞中DNMT1,MBD3及MBD4的mRNA水平较正常对照相比显著下调(P=0.001,P=0.002,P=0.021);DM患者CD4+T细胞中DNMT的表达与正常对照相比没有差异,但其MBD2及MeCP2的mRNA水平明显升高(P=0.046,P=0.000)。(3)SLE患者CD4+T细胞中DNMT1的mRNA水平与整体基因组DNA甲基化水平呈正相关性(r=0.746,P=0.013);SSc患者CD4+T细胞中MBD4的mRNA水平与整体基因组DNA甲基化水平呈正相关性(r=0.804,P=0.005)。结论:SLE及SSc患者CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平低下,DNMT及MBD表达的异常可能在SLE、SSc患者CD4+T细胞DNA低甲基化改变中起作用,从而参与疾病的发病过程。