【摘 要】
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目的:本实验通过建立光老化小鼠模型,予以桃红四物汤进行干预,观察干预前后各组小鼠皮肤组织病理形态学改变,自噬标志物LC3-Ⅱ、Beclin1、P62相关蛋白的表达情况,探讨桃红四物汤对光老化小鼠自噬相关蛋白的影响,为进一步开展临床研究、预防和治疗皮肤光老化奠定基础。材料与方法:8周龄SPF级昆明小鼠40只,随机分成4组,分别是空白对照组、光老化模型组、桃红四物汤组、VE对照组,每组10只。适应性常
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目的:本实验通过建立光老化小鼠模型,予以桃红四物汤进行干预,观察干预前后各组小鼠皮肤组织病理形态学改变,自噬标志物LC3-Ⅱ、Beclin1、P62相关蛋白的表达情况,探讨桃红四物汤对光老化小鼠自噬相关蛋白的影响,为进一步开展临床研究、预防和治疗皮肤光老化奠定基础。材料与方法:8周龄SPF级昆明小鼠40只,随机分成4组,分别是空白对照组、光老化模型组、桃红四物汤组、VE对照组,每组10只。适应性常规饲养一周后,剔除小鼠背部毛发,除空白组以外皆予以UVA联合UVB紫外线灯照射其背部,照射频率为每周7次,每次2小时,共照射7周,建立光老化小鼠模型。造模成功后模型组予以等剂量生理盐水、桃红四物汤组予以桃红四物汤药液、VE组予以VE溶液经口灌胃干预,每日1次,剂量均为0.4ml/只。给药4周。末次给药后,隔天将小鼠颈椎脱臼处死,取背部皮肤组织用于各试验检测。HE染色观察皮肤形态变化;免疫组化法检测各组小鼠皮肤组织中LC3Ⅱ,Beclin1蛋白的表达;Western-blot法检测各组小鼠皮肤组织中自噬相关蛋白LC3Ⅱ,Beclin1,P62的表达水平。结果:1.小鼠背部HE染色结果与空白对照组相比,模型组小鼠表皮层厚度增加,出现分层且界限不清,真皮层纤维组织排序混乱,分布不均,可见炎性浸润。与模型组相比,桃红四物汤组,小鼠皮肤结构较为完整,表皮厚度降低,炎性浸润减少,胶原纤维束断裂减少。VE组真皮层组织排列更为有序,表皮厚度降低,炎性浸润降低。2.western-blot结果与空白组相比,模型组小鼠皮肤组织中LC3Ⅱ、beclin-1水平降低,P62水平增加（P＜0.01）;与模型组相比,桃红四物汤组,VE组LC3Ⅱ、beclin-1水平增加,P62水平降低（P＜0.01）;VE组与桃红四物汤组相比较无明显统计学差异。3.免疫组化结果与空白组相比,模型组小鼠皮肤LC3-Ⅱ的表达降低（P＜0.01）、Beclin1表达降低（P＜0.01）;与模型组相比,桃红四物汤组,VE组LC3-Ⅱ、beclin-1水平增加（P＜0.01）;VE组与桃红四物汤组相比较无明显统计学差异。结论:1.紫外线照射可以抑制细胞自噬活性。2.桃红四物汤能增强细胞自噬,从而抑制紫外线诱导的皮肤损伤老化过程,但其具体机制需要进一步探讨。
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