膜荚黄芪[Astragalus membranaceus（Fish.）Bge.]为豆科黄芪属植物,主产于东北、华北及西北。黄芪味甘、性温,归脾和肺经,具有补气升阳,固表止汗,利水消肿,生津养血,行滞通痹,托毒排脓,敛疮生肌的功效。黄芪因采摘后留其根部入药而造成药用资源的极大浪费,现代研究表明,黄芪叶具有调节免疫、延缓衰老、保护心脑血管和抗菌抗肿瘤等药理作用,因此,为保护野生黄芪及开发新型药用资源,本论文对膜荚黄芪叶中的活性成分进行了如下研究:对黄芪叶乙醇提取物中的化学成分进行研究。使用硅胶、ODS柱色谱和制备型HPLC等分离方法,从膜荚黄芪叶乙酸乙酯和正丁醇层中共分离出15个化合物,采用NMR谱并结合ESI-MS质谱技术,共鉴定了 11个化合物的结构,包括5个黄酮类化合物,分别为山奈酚3-O-[6"-O-（反式-对-肉桂酰基）]-β-D-葡萄糖苷（1）、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-（1’"→2"）-β-D-芹糖（2）、鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷（3）、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖苷（4）、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）;4个三萜皂苷类化合物,分别为黄芪叶苷K（6）、黄芪甲苷（7）、cycloaraloside A（8）、黄豆醇B（9）;2个其他类化合物,胡萝卜苷（10）、去氢二松柏醇-4-O-β-D-葡萄糖（11）。本文建立了 RP-HPLC法同时测定黄芪叶中3种黄酮和1种木脂素类成分,鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-（1’"→2"）-β-D-芹糖、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖苷和去氢二松柏醇-4-O-β-D-葡萄糖的含量。色谱柱采用Diamonsil-C18（5 μm,4.6 mm×250 mm）色谱柱;流速为1.0 mL/min;进样量为10 μL;柱温为25℃;检测波长为266nm;流动相:乙腈（A）-水（B）,梯度洗脱（0～30 min,15%A→45%A）。4种成分在相应的线性范围内线性关系良好。精密度的RSD为1.62%～1.89%;加样回收率为 98.87%～102.21%,RSD 值为 2.46%～3.31%;稳定性的 RSD 为 1.79%～2.18%。本研究建立了一种简单、准确、高效的UPLC-MS/MS分析方法,同时测定了比格犬血浆中鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮苷、鼠李柠檬素3-O-β-D-葡萄糖苷、黄芪叶苷K和黄芪甲苷的血药浓度并计算相应药动学参数,同时对比了黄芪叶提取物的肠溶胶囊和普通胶囊在比格犬体内对4中化合物代谢影响情况。以菝葜皂苷元为内标,采用甲醇-碳酸钠沉淀法进行血浆样品处理。色谱柱为ACQUITY UPLC? BEH Amide（1.7 μm,2.1 mm×100 mm）;流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈溶液（B）;梯度洗脱:0-3min（70%-85%B）;采用正离子检测,MRM扫描模式。优化后4种分析物及内标的离子对分别为:鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮苷（m/z 609.1→300.9）、鼠李柠檬素3-O-β-D-葡萄糖苷（m/z 463.5→300.9）、黄芪叶苷 K（m/z 687.6→143.1）、黄芪甲苷（m/z 807.7→627.4）,内标（m/z417.3→273.2）。4种成分在各自的线性范围内均呈良好的线性关系,LLOQ分别为0.675 ng/mL,0.650 ng/mL,0.775 ng/mL和1.05 ng/mL。黄芪叶提取物的普通胶囊中鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮苷、鼠李柠檬素3-O-β-D-葡萄糖苷、黄芪叶苷K和黄芪甲苷在比格犬体内的Tmax分别为 1.28±0.21 h,1.22±0.19h,2.32±0.37h,2.14±0.24h,肠溶胶囊的Tmax分别为2.23±0.29 h,2.34±0.46 h,3.18±0.33 h,3.23±0.51 h。实验过程中样品的提取回收率、精密度及稳定性等均符合生物样品分析测定的要求。开发药用新资源“黄芪叶”对于保护野生黄芪资源、促进黄芪药用资源的可持续性和综合开发利用具有重大意义。本文通过对黄芪叶中活性成分进行研究,以期为黄芪叶质量标准的制定及深入药理活性研究提供参考依据。