苏云金芽胞杆菌表面展示多聚组氨酸肽及Aii抗菌蛋白

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该研究选用了苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)CTC菌株的S-层蛋白作为表面展示的载体,利用S-层蛋白的N-端信号肽以及锚定序列将与之融合的两个乘客蛋白多聚组氨酸肽和Aii抗菌蛋白带到胞外并锚定在细胞的表面.两个乘客蛋白在细胞表面成功的发挥了它们的生物学功能.该研究还Aii抗菌蛋白展示在了苏云金芽胞杆菌无晶体突变株4Q7的表面.设计引物,以质粒pGEMT-4Q7aii为模板,PCR扩增得到了Aii蛋白编码基因,利用两端引入的Xbal和Sph1位点将它插入Pbmb929-304 S-层基因C-端的相应位点内,得到重组质粒pSAⅡ.将pSAⅡ转进4Q7/pCSA中.在CTC-Aii融合蛋白对蔬菜软腐病的抑制实验中,4Q7/ pSAⅡ与软腐病致病菌胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)SCG1的4倍稀释物混合作用0.5小时,软腐病仍有一定程序的发生;混合作用2小时,能够较好的抑制软腐病的发生,抑菌效果明显优于对照菌4Q7/pCSA;混合作用4小时,4Q7/ pSAⅡ和对照菌4Q7/ pSAⅡ均能控制软腐的发生.
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