产纤维素酶菌株筛选及与离子液体协同降解玉米秸秆研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cmudh134
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
玉米秸秆作为来源丰富、易于获得的可再生生物质资源。不合理的处理方法导致资源严重浪费,同时还造成了环境污染。由于纤维素是玉米秸秆生物质的主要组成成分,因此寻找高效可行的纤维素预处理方法和降解方法,不仅可以降低利用秸秆等生物质生产生物乙醇的成本,而且对于资源的合理化利用及环境保护具有重要意义。根据近年来国内外研究现状,纤维素酶活力不高是限制秸秆等生物质资源利用的主要因素之一。因此,筛选高产纤维素酶菌株成为关键问题。本实验利用刚果红染色法、碘染色法,从黑龙江省大兴安岭地区及山东省莱芜市玉米秸秆地土壤中分离筛选得到两株高产纤维素酶菌株。根据菌落形态观察和ITS序列同源性分析,确定为微紫青霉菌(Penicillium janthinellum FHH1)和草酸青霉菌(Penicillium oxalicum FLY4)。通过产酶条件优化,P.janthinellum FHH1以玉米秸秆为碳源,牛肉膏为氮源,初始p H 9.0,30℃,150 r/min培养9 d,CMCase、β-gluase和FPase酶活力分别为0.383 U/m L,0.421 U/m L,0.111 U/m L。菌株P.janthinellum FLY4以玉米秸秆为碳源,蛋白胨为氮源,初始p H 5.0,30℃,150 r/min培养7 d,CMCase、β-gluase和FPase酶活力分别为0.430 U/m L,0.484 U/m L,0.047 U/m L。将菌株在不同Na Cl及离子液体浓度下培养后发现,两株菌均不具有Na Cl及离子液体耐受性。通过纤维素酶p H和温度条件优化,P.janthinellum FHH1纤维素酶水解的最适条件为:p H 4.0,温度60℃时酶活力最大,CMCase、β-gluase和FPase酶活力分别为0.561 U/m L,1.335 U/m L,0.062U/m L;P.oxalicum FLY4纤维素酶水解的最适条件为:p H 4.0,温度35℃时酶活力最大,CMCase、β-gluase和FPase酶活力分别为0.727 U/m L,0.194 U/m L,0.144 U/m L。考察纤维素酶的Na Cl及离子液体稳定性发现,P.janthinellum FHH1粗酶液在Na Cl浓度低于15%时,CMCase几乎没有变化,当Na Cl浓度为15%时,酶活力达到最大值为1.039U/m L。P.oxalicum FLY4在缓冲液中Na Cl浓度高于40%时,CMCase酶仍然可以达到未添加Na Cl时酶活力的55%。但离子液体对纤维素酶的影响较大,P.janthinellum FHH1和P.oxalicum FLY4的纤维素酶均不具有离子液体稳定性。此外,由于秸秆木质纤维素原料成分复杂,秸秆纤维素具有很高的结晶度和聚合度,影响了纤维素酶有效地将纤维素水解成可利用的还原糖。离子液体预处理过程可有效地打破木质纤维素致密结构,降低纤维素的结晶度,玉米秸秆能够被更高效地降解和利用。离子液体作为绿色有机溶剂,与其它有机溶剂相比,具有低挥发性、热稳定性、相对环境友好。本文合成八种离子液体[(PYR)C4Cl][PF6]、[(PYR)C5Cl][PF6]、[PF6][(PYR)C4(MIM)][Cl]、[PF6][(PYR)C4(PYR)][Cl]、[PF6][(PYR)C5(MIM)][Cl]、[PF6][(PYR)C5(PYR)][Cl]、[(MIM)C2COOH][PF6]和[(PYR)C2COOH][PF6],并对合成的离子液体进行核磁氢谱表征,测定了热重分析、熔点、溶解性等性质。选择其中四种离子液体[PF6][(PYR)C4(MIM)][Cl]、[PF6][(PYR)C4(PYR)][Cl]、[(MIM)C2COOH][PF6]和[(PYR)C2COOH][PF6]单独或协同使用对玉米秸秆进行预处理。使用离子液体[(PYR)C2COOH][PF6]与[PF6][(PYR)C4(PYR)][Cl]协同处理玉米秸秆效果较好,在预处理8 h时还原糖产率最高,为20.75%。本文对循环使用过程中离子液体和还原糖进行测定。[(MIM)C2COOH][PF6]与[PF6][(PYR)C4(MIM)][Cl]在重复使用三次时,离子液体的回收产率为94.91%、86.76%、93.5%,还原糖的产率为100%、81.91%、80.2%。[(PYR)C2COOH][PF6]与[PF6][(PYR)C4(PYR)][Cl]在重复使用三次时,离子液体的回收产率为81.17%、80.73%和85.27%,还原糖的产率分别为100%、75.1%、79.05%。实验结果表明回收的离子液体可以进行多次的重复使用,而且效果较好。采用P.janthinellum FHH1和P.oxalicum FLY4的纤维素酶酶解玉米秸秆,均在酶解96 h时达到最佳效果,分别为18%和33.75%。酶解经过离子液体预处理后的秸秆残渣,测定还原糖产率。菌株P.janthinellum FHH1在酶解96 h时出现最大值,还原糖产率为30.93%。菌株P.oxalicum FLY4在酶解72 h时出现最大值,还原糖产率为52.37%。综上所述,本文筛选得到两株产纤维素酶真菌,优化产酶条件,测定了菌株及纤维素酶对Na Cl和离子液体的耐受性,并且合成了一系列离子液体并应用于玉米秸秆木质纤维素的预处理过程中,采用纤维素酶酶解经离子液体预处理后的玉米秸秆残渣,还原糖产率较高。因此,本实验所筛选获得的菌株以及合成的离子液体在玉米秸秆纤维素的降解中有重要意义及良好的应用前景。
其他文献
聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)作为一种半结晶热塑性聚酯材料,由于具有良好的力学性能、耐候性、耐化学腐蚀性及耐疲劳性等优点,被广泛的应用于汽车、电子电器及机械等领域。但PET本身易燃的缺点极大地限制了PET在具有燃烧安全性要求领域中的应用,因此对PET材料的阻燃改性显得尤为重要。本论文采用课题组自制的两种含P-C键的阻燃剂—二异丁基次磷酸铝(APBA)和苯乙基桥链DOPO(DIDOPO)对PET材料
在我国进入经济新常态的背景下,经济发展模式逐渐由要素粗放型驱动向创新驱动转变,企业创新亦成为社会热点话题。创新不仅是经济增长的重要内生变量,也是企业竞争优势来源,但事实是目前中国的创新能力不足,创新成果难以在国际竞争中取得优势,在企业层面则表现为企业创新动力不足以及创新体系效能不高。因此,如何提高企业创新水平以及创新质量,一直备受社会各界关注。税负水平是影响和制约企业创新的重要因素之一,但是基于实
随着信息技术的发展,不同国家之间的政治、经济和文化联系越来越紧密,时代对人们理解多元文化、尊重文化差异的意识与跨文化交流合作的能力提出了迫切的要求,学校必须实施高质量的多元文化美术教育课程,才能培养出适应多元文化背景的未来人。而美术教材是美术课程内容的重要载体,是引导学生认知发展、人格构建的一种范例,是教师与学生沟通的桥梁,对多元文化教育课程的实施起着重要作用。因此,对美术教科书中的多元文化现状进
随着全球航运和贸易的发展,船舶航行密度增大、航速提高,运输船舶在向大型化、专门化发展,有时需要在限制水域中航行。为满足国防、海洋和救助工程等领域的需求,促进了小水线面高性能船舶的发展。单螺旋桨单舵船舶是海洋运输船舶采用最多的船型;双桨双舵船型在客船、军用舰船,工程船舶及部分运输船舶中获得了越来越多的应用;小水线面双体船和三体船作为高性能船舶近年来在国民经济和军用舰船中发挥了日益重要的作用。研究上述
随着中国经济的飞速发展,建筑业形成中国经济的支柱产业而迅猛发展。近年,在建筑业高度发展的时代,仍存在大型的开发建设单位因建设工程施工质量引发的事故给社会和人民带来了生命与财产损失的事件仍然较多,其主要原因是对施工质量信息的及时、全面掌握存在不足。如何通过有效收集与传递质量信息,更有效、合理地规划与控制建筑工程的施工质量,进行持续的施工质量改进,具有重要的现实意义。本文以长沙市德永置业有限公司山水城
目前世界各国对镍的需求量不断地增加,目前镍生产仍依赖于传统的火法镍冶金技术和湿法冶金技术,耗能较大或浸出率低。常压硫酸浸出工艺具有低耗能,高浸出率等优点。本文进行常压下硫酸浸出红土镍矿的实验,采用硫酸为浸出剂,在常压(大气压)下,研究硫酸浓度、浸出温度、固液比、搅拌速率、浸出时间、还原剂种类等因素对常压硫酸浸出红土镍矿中铝、锰、铁、镍的实验浸出率的影响,结果表明:最佳的浸出条件为浸出温度90°C、
电控空气悬架(ECAS)能够根据工况的不同来调节悬架的刚度,从而提升车辆的综合性能。传统的车辆控制单元采用串行开发模式,已经不能满足电子产品的更新速度,硬件在环仿真技术为控制器的开发提供了便捷有效的途径。本文将带有附加气室的ECAS系统作为研究对象,以实验室现有改装车辆为基础,提出了模糊PID控制策略并进行了仿真试验,通过对硬件在环仿真试验平台软硬件的设计,结合试验车辆进行了整车道路试验并验证了控
微波是一种特定频段的电磁波,其作为一种清洁、高效的新能源已经在化工、生物、冶金、食品工业等工业领域得到了广泛应用。微波加热的升温速度快、节能、选择性加热、易控性
众所周知,男性创业者会比他们的女性竞争对手获得更多的融资,但是这种分配不公平融资现象背后的潜在机制仍然有待商榷。基于信号理论和刻板印象理论,本研究认为该现象源于投资者对创业者传达信号的不同解读以及性别和外貌上的偏见。通过对2014-2017年四档火爆创业真人秀共计384个创业者路演数据的一项实证研究揭示了虽然创业者高的人力资本和外貌资本都有利于融资结果,但是投资者在融资过程中倾向于看重男性创业者的
作为泰州学派的创始人,王艮身本论思想在其思想体系中具有举足轻重的地位,而“明哲保身”则是其身本论中最具争议性的概念。面对明中后期严峻的政治生态,王艮针对士大夫群体提出“明哲保身”来应对当时的政治现实,以其师阳明所倡之“良知”为理论依据,主张保身而后可保天下国家。王艮的明哲保身论最初便是对为官的士人同志所发出的呼吁,应当置于当时的政治背景下加以考察。王艮之后,泰州学者继承其师保身弘道之志,在谨慎抉择