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第一部分PCBP1表达对结直肠癌奥沙利铂敏感性的影响目的：探讨多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)对结直肠癌细胞奥沙利铂敏感性的影响,为预测结直肠癌奥沙利铂耐药性提供分子标志物。方法：(1)PCBP1-siRNA转染HT-29/L-OHP细胞,沉默PCBP1表达,western blot、实时荧光定量PCR技术检测基因沉默效果,筛选出干扰效率最高的siRNA序列。(2)CCK8法检测PCBP1沉默前后HT-29/L-OHP对奥沙利铂的IC50。(3) PCBP1-siRNA转染HT-29细胞,沉默PCBP1表达,CCK8法检测PCBP1表达沉默前后HT-29细胞对奥沙利铂的IC5o。(4)PCBP1质粒转染HCT-116细胞,增强PCBP1表达,CCK8法检测PCBP1表达增加后HCT-116细胞对奥沙利铂的IC50。结果：(1)PCBP1-siRNA转染后细胞PCBP1表达水平下降。干扰序列PCBP1-siRNA (Sense: GAGUGUGUCAAGCAGAUUUTT; Antisense: AAAUCUGCUUGACACACUCTT)的蛋白抑制率为(74.33+1.52)%；基因沉默效率为(58.77±0.48)%。(2) HT-29/L-OHP对奥沙利铂的IC5o为(26.57+1.25)ug/ml;沉默PCBP1表达后,HT-29/L-OHP对奥沙利铂的IC50降至(16.93+0.96)ug/ml,差异统计学意义(t=55.56,p<0.01)。(3)PCBP1在HT-29中表达量较高,而在HCT-116中呈低表达。(4)细胞HT-29对奥沙利铂的IC50为(3.80±0.53)ug/ml;沉默HT-29中PCBP1表达,HT-29对奥沙利铂的IC5o降为(2.53±0.42)ug/ml,二者差异具有统计学意义(t=19.52,p<0.01)。(5)细胞HCT-116对奥沙利铂的IC50为(17.45±1.36)ug/ml,PCBP1的表达增加后HCT-116对奥沙利铂的IC50上升至(34.48±5.44)ug/ml,结果具有统计学差异(t=-7.65,p<0.01)。结论：PCBP1的表达增加使结直肠癌细胞株对奥沙利铂的敏感性降低,PCBP1可能作为预测结直肠癌奥沙利铂耐药的分子标志物。第二部分干扰素诱导的跨膜蛋白1在结直肠癌组织中的表达与临床意义目的：通过高通量组织芯片检测干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)在结直肠癌中的表达水平,分析IFITM1蛋白的表达与临床病理特征及患者预后的关系,明确IFITM1是否为结直肠癌的预后的分子标志物。方法：病例标本来自2006年7月至2007年8期间在南京医科大学附属淮安第一医院进行结直肠癌根治术的结直肠癌患者,共180例。同时收集每例癌组织相匹配的癌旁组织180例作为对照。对这180名结直肠癌患者进行随访,收集包括年龄、性别、发病部位、组织分化水平、TNM分期及生存状态等病例资料。所有病例随访至2011年8月。使用SPSS18.0软件进行分析,以双侧检验P<0.05为差异具有统计学意义。IFITM1在肿瘤组织和相应癌旁组织间的表达差异用Wilcoxon秩和检验检验。IFITM1的表达与临床病理特征之间的关系采用Pearson卡方检验。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox比例风险回归模型进行单因素和多因素分析,探讨IFITM1对结直肠癌患者生存率的影响。结果：(1)IFITM1蛋白在结直肠癌中的表达水平与癌旁组织并无明显差别(p=0.384)。结肠腺癌组织中,IFITM1蛋白的表达显著高于结肠癌旁组织中的表达(p=0.044)；在直肠腺癌组织中,IFITM1蛋白的表达与直肠癌旁组织无显著差异(p=0.569)。(2)IFITM1蛋白表达水平与结直肠癌的分化程度相关,差异具有统计学意义(χ2=10.667,p=0.031)。而与性别、年龄、肿瘤发生部位、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期均无显著相关性。(3)Kaplan-Meier生存分析表明,直肠腺癌中IFITM1的表达越高,患者的生存时间越短(χ2=0.271,p=0.037)；在结肠腺癌中,IFITM1的表达水平越高患者的生存时间越短,但差异无统计学意义(χ2=6.589,p=0.873)。单因素和多因素分析均表明IFITMl的表达水平不是影响结直肠癌患者预后的独立因素。结论：在直肠癌中,IFITM1蛋白的表达和患者的预后相关,是预测结直肠癌预后有价值的指标。