粪便中乙肝病毒的定量检测及其与乙肝病毒标志物的相关性研究

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目的:建立定量检测粪便中HBV-DNA的方法。通过测定乙型肝炎患者粪便中乙型肝炎病毒标志物(HBVM)和HBV-DNA的存在情况,探讨粪便在乙型肝炎病毒传播流行中的意义。材料与方法:采集50例乙型肝炎未并发消化道出血病患的血液和粪便标本,采用酶联免疫法检测粪便和血清中乙肝病毒标志物,QIAmp DNA Stool kit试剂盒法提取粪便总DNA,巢式PCR定性检测粪便中HBV-DNA,FQ-PCR定量检测血清和粪便HBV-DNA。结果:根据血清HBVM标志物阳性的不同组合(感染模式)将50例患者分成3组,粪便HBsAg阳性37例,血清HBsAg阳性46例,两者检出率在统计学上存在差异(P<0.05),1例血清阴性者,粪便中HBsAg阳性。FQ-PCR定量检测血清和粪便HBV-DNA含量分别为4.35±1.49和4.50±1.59。血清HBV-DNA检测,30例阳性(60%),粪便中HBV-DNA共检测出31例阳性(62%)。结论:建立了定性和定量检测粪便中HBV-DNA的方法。在研究的粪便中HBV-DNA最高含量达到2.245×108copies/ml,证实了HBV存在于乙肝患者的粪便中,说明粪便可能具有传染性,可以作为传播HBV的媒介。
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