饮茶与骨质疏松的meta分析及优化制备EGCG纳米硒的研究

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茶,来自于茶树(Cameliasinensis(L.)O.Kuntze),并在很久之前就被看作是一种促进健康的饮料,能预防许多种疾病。作为茶叶中重要的功能成分,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)发挥了很强的生物功效。硒作为不可缺少的微量元素,能够抵抗多种疾病,并且广泛存在于茶叶当中。已有很多研究表明EGCG和硒元素能够促进成骨细胞的分化。骨质疏松是一种代谢性骨疾病,其特征是伴随骨形成减少而产生的骨再吸收的状态增加,导致骨密度的减少和骨质量的恶化,从而产生发生骨折的危险。已经有许多关于饮茶与骨质疏松之间的关系的人类研究,但说法各不相同。本研究采用meta分析方法探讨饮茶与骨质疏松之间的关系,以茶叶功能中的EGCG和微量元素硒为对象,通过优化制备条件成功制备了 EGCG纳米硒(EGCG-SeNPs),探索了其在强酸或者高温环境下特性,并分析了其口服生物利用度,以期提高EGCG分散的纳米硒的可获得性和应用性。本研究的主要方法和主要结果如下:1.饮茶能够低骨质疏松的风险。我们系统地搜索了 PubMed,EMBASE和万方数据库,截止到2016年3月30日,没有任何的语言限制。通过在所有分析中使用随机效应模型,得出95%置信区间的奇数比(OR)。通过使用CochraneI对统计学异质性进行了分析,然后通过采用亚组分析和多轮删除的方法找到了主要的异质性来源。通过使用漏斗图来推测发表偏倚。我们的meta分析基于17项研究,包括2项前瞻性队列研究,4项病例对照研究和11项横断面研究。我们发现,饮茶与骨质疏松之间关系的OR值为0.62(95%CI,0.46-0.83),各研究之间有显著的异质性(I2=94%,p<0.01)。漏斗图表明,饮茶与骨质疏松之间关系不存在发表偏倚。亚组分析表明,饮茶可以降低几乎所有亚组中骨质疏松的风险。2.以EGCG为分散剂、维生素C(Vc)为还原剂能够在先酸后碱的条件下成功制备EGCG-SeNPs,并具有良好的稳定性和抗氧化性。在室温下,将适量的EGCG和一定浓度的亚硒酸钠溶液混合,然后加入一定量的Vc进行搅拌,先将溶液调节至pH2.5,搅拌5 min后调节至pH 8.5,通过丁达尔效应确认为EGCG-SeNPs胶体。通过透射电子显微镜(TEM)和Zeta电位仪对EGCG-SeNPs进行表征,得出颗粒大小约为35 ± 0.12 nm,Zeta电位为一0.05 mV。通过探究EGCG-SeNPs的酸碱和温度特性发现,在强酸和高温条件下EGCG-SeNPs仍能保持纳米颗粒特性。用超高效液相(UPLC)对不同时期的纳米硒中的EGCG稳定性进行测定,发现制备EGCG含量在一个月前后没有发生显著变化。用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)和活性氧(ROS)的方法检测到了EGCG-SeNPs的强抗氧化性。3.用Vc作为氧化还原剂合成的EGCG-SeNPs在通过胃酸环境时只发生轻微地聚沉,生物利用度得到了良好的保持。通过对缺硒雄性ICR小鼠灌胃EGCG-SeNPs和同浓度(25、50、100 μgSe/kg)的亚硒酸钠处理后的溶液,检测其体内的硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性。结果表明,在肝脏和肾脏中,50和100μgSe/kg亚硒酸钠和EGCG-SeNPs处理组的硒含量均显著增加;在血清、肝脏和肾脏中,所有处理组的GPx活性均显著增加,且具有剂量依赖效应。然而,相同剂量下,亚硒酸钠和EGCG-SeNPs之间在硒含量和GPx活性上没有显著差异。
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