GmGBL基因转化大豆的初步研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzwxy105
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大豆(Glycinemax(L.)Merr)是人类饮食和畜禽饲养最重要的植物蛋白来源之一,含有人体必需的氨基酸。人类对大豆蛋白的消耗超过其它一般食品资源。尽管大豆是一种优异的蛋白资源,但含硫氨基酸半胱氨酸(Cys)和蛋氨酸(Met)含量低,限制其营养价值。利用生物工程手段改良蛋白品质即提高食用大豆含硫氨基酸的含量,有效的措施之一就是对涉及硫同化路径中的酶进行遗传操作。胱硫醚β-裂解酶(Cystathionineβ-Lyase,CbL)是甲硫氨酸生物合成路径中参与倒数第二步反应的关键酶,也是半胱氨酸代谢途径中的关键酶,在含硫氨基酸代谢途径中发挥着非常重要的作用。本研究主要取得了以下研究进展:   1、实验室前人对定位于大豆3号染色体的胱硫醚β-裂解酶基因GmCBL进行了烟草功能验证,发现过量表达GmCBL能提高烟草Met含量。因此本文对GmCBL重新构建了含有草丁膦抗性的植物表达载体,并用农杆菌介导子叶节的方法在大豆中进行了遗传转化,以期能够得到该基因过量表达的植株,进而提高含硫氨基酸含量。   在此研究中,发现在芽诱导初期不添加筛选剂,后期添加3-6mg/L的草丁膦,在芽伸长时期减至0.5-2mg/L是比较合适的筛选压力。针对不同受体基因型,筛选压力不同。   最后共得到转化苗102株南农88-1,35株Jack,11株猴子毛。经过PCR检测共获得阳性植株16株:分别为13株南农88-1,2株Jack,1株猴子毛。   2、利用花粉管通道法对一些大豆品种进行了遗传转化,并对其后代用对应的抗性进行了田间筛选。   在此研究中,发现得出第一对真叶期150mg/LHyg+0.10%Tween-20的组合、400mg/LKana+0.10%Tween-20的组合、150mg/LBasta+0.10%Tween-20的组合以及第一组复叶期250mg/LHyg+0.10%Tween-20的组合是比较合适的喷洒浓度。   在T2代共得到抗性苗:抗潮霉素的pMDC83-GmCBL有232株,抗卡那霉素的pBI121-35S-GmOASTL4-gfp有45株和pBI121-ap-GmOASTL4-gfp有45株,抗Basta的pCambia1300-BAR-GmDof4有28株和pCambia1300-BAR-GmDofll有62株。
其他文献
高中化学与生活有着密不可分的关系,在生活中可以经常发现很多化学现象。因此,在高中化学教学中,应该将化学与生活进行有效的结合,在实际生活中不断的发现化学现象,在化学实验中引
新课程给初中生物教学提出了更高的要求,更加注重学生学习能力、知识运用能力的培养,并且增加了教学实践环节。为满足教学要求,实现教学目标的完善,本文结合微课、思维导图、课程
高中是学生整体学习过程中最重要的阶段,此阶段的学习影响和决定了学生后阶段的教学。随着教学改革的不断深入和发展,高考也逐渐发展和演化出了新模式。在高考新模式理念下,学生
棉花是世界上最重要的天然纤维作物,提高其产量和纤维品质始终是育种工作的重要目标。由于棉花产量和品质性状都是基因和环境相互作用共同影响的数量性状,利用传统育种手段对其
微课作为一种新型的教学方式,它具有形式新颖、内容丰富、不受空间限制的特点,再加上微课直观的教学形式非常符合小学生的认知特点,所以它在教学中就得到了非常广泛地运用。在小
随着信息技术的发展,在初中物理课程中也在积极进行信息化的改革,适应现代教育的要求,对学生进行针对性教育,指导学生学习各种物理知识,培养学生的物理素养。在初中物理课程中教师
在新课程改革的不断推进下,初中地理教学过程中,不仅要重视学生对于地理知识的掌握,更重要的是要培养学生的实践能力,教师通过不同的教学方法有效的落实地理的实践力,培养学生对于
株高作为水稻重要的农艺性状之一,直接关系到水稻的产量,株高过高容易引起植株倒伏产量减产,适当矮化则可以达到抗倒、增产的目的。对矮杆水稻的研究有助于了解和完善矮源多样性
随着新课改的不断深入,初中物理教学也迎来了新的挑战,在现阶段初中物理教学过程中,除了物理实验教学中所需要实验器材之外,自制学具也为初中物理教学提供了更加丰富的教学方法。
在经济飞速发展的大浪潮之下,许多新生事物如竹笋一样拔地而起。这些新生事物的产生同时也促进了经济的发展。新时代的发展步伐影响着我们衣食住行等生活中的方方面面。在教育