孑遗珍稀植物领春木群落生态和遗传多样性研究

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领春木(Euptelea pleiospermum Hook.f.et Thoms.)为领春木科(Eupteletaceae)、领春木属(Euptelea Sieb.&Zucc.)的落叶灌木或小乔木。领春木科为东亚特有的单型科,仅含领春木属,该属共有2种,另外1种E.polyandra Sieb.&Zucc.分布于日本和朝鲜。领春木为国家3级保护植物,是典型的东亚植物区系成分的特征种,又是古老的孑遗珍稀植物,对研究植物系统发育、植物区系都有一定的科学意义。目前对领春木的研究多限于形态学、解剖学和细胞学等方面。系统的研究尤其是定量分析研究较少。它的分布范围和数量已非常有限,如果适合该物种生存的有限生境再遭到破坏,该物种便会从地球上消失。因此,在自然物种的保存等方面,都具备了被研究和保护的价值。本文则对领春木的群落生态和遗传多样性进行了基础性的研究。结果如下:1)采用常规野外调查法对领春木32个样地进行了群落学调查,并用等级分类技术中的双向指示种分析法(TWlNSPAN)进行了数量分类,根据结果划分出了7个群落类型:领春木—山矾—鸢尾群丛、领春木+杉木—三颗针—大百合群丛、领春木—山茱萸+尾叶樱—贯众+紫堇群丛、领春木+灯台树—短序荚蒾—紫花地丁+蛇莓群丛、领春木+腊莲绣球—沿阶草群丛、领春木—构树—冷水花群丛和黑壳楠—领春木—蝴蝶花+贯众群丛。2)DCA二维排序展示了环境因子对领春木群落结构的影响。无论是对32个样方还是对91个物种的排序,都呈现相同的趋势。海拔1200m左右为领春木分布较广的区域。随着海拔的降低,领春木的分布也在减少,低于800m以后就很少有分布了。加上其他环境及人为因素的综合影响,使领春木的分布随轴1向右呈扩散趋势,分布范围越来越分散。主要原因之一是生境的破坏,导致部分领春木种群的死亡及演替。3)领春木RAPD反应程序的建立。优化所得PCR反应25μ1体系为:dNTP0.16mmol/L、模板DNA 50ng、Taq DNA聚合酶1.25U、Mg2+1.5mmol/L、引物0.24μmol/L。最佳扩增程序为:94℃预变性4min:94℃变性60s,36℃退火30s,72℃延伸80s,35个循环;72℃延伸10min:4℃保存。4)扩增结果显示领春木5个种群的总多态位点百分率(Proportion of Polymorphic Sites,PPS)为87.18%。领春木种群内遗传多样性Shannon指数估计的平均值为2.9779,种内遗传多样性平均值为3.6584。经Shannon指数估计由10条引物检测到的5个种群间的遗传分化为18.41%。根据Nei的遗传分化指数估算的5个种群的总群体的基因多样性为0.3162,种群内的基因多样性为0.2648,种群中的基因多样性0.0514,基因分化系数0.159。两种指数的结果是一致的都表明种群间的分子变异只占总的基因多样性的小部分,大部分的遗传变异存在于种群之内。5)种群间的遗传距离的矩阵显示:从遗传相异性来说5个种群间的遗传距离都不是很大。种群4和种群5的遗传距离最大只有0.0817,从遗传一致性来说,种群1和种群2之间的遗传相似度最高,Ⅰ值为0.9710。采用算术平均数的非加权成组配对法(UPGMA)对Nei的遗传距离进行聚类分析,分析结果显示pop1(黑山谷种群)与pop2(南川种群)两个种群的遗传距离最近,与pop4(巫溪种群)的遗传距离最远。以上的结果与实际的地理分布情况基本上是一致的。地理距离较远的遗传距离也较大。6)研究结果表明引起重庆市野生领春木日益减少的原因主要不是在其遗传多样性方面,而是人为的干扰破坏。因此建议在人为活动较强的地区,实行就地保护,合理采伐;在分布集中的地域,建立领春木自然保护区,禁止破坏性利用,防止各种人为干扰,充分发挥领春木群落的生态和经济效益。植物园可引种栽培,在其适宜生长的地区可栽作绿化观赏树种。
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