外源ABA对番茄幼苗抗冷性影响的研究

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番茄因其富含各种微量元素、易种植、适应性强、产量高、应用范围广等优点被全世界大多数人所喜爱,成为我们日常生活中不可缺少的蔬菜之一。同时,中国是生产番茄的大国,其种植面积约占整个蔬菜栽培的40%,在农业生产作物中具有重要地位。而低温气候是影响我国番茄生产重要因素之一,尤其在北方寒冷季节较长的地区,怎样克服气候对蔬菜产量的影响成为关系到农民生产生活的重要问题。相同的温室大棚栽培技术拥有耐低温的番茄种质资源更为重要,有些番茄在寒冷季节产量过低,即影响市场供应,又影响农民收入。所以,根据市场需求,选育抗低温的番茄品种十分迫切。番茄耐低温性状属于数量性状,受到多种基因体系控制,遗传规律非常复杂。本研究为了探明外源ABA对番茄低温胁迫的缓解作用,以高代自交系“东农11537”番茄幼苗为试验材料,通过叶面喷施不同浓度的ABA后对番茄幼苗抗低温的生理变化及差异基因表达的研究,试验结果如下:(1)通过对长势相同的几组番茄幼苗进行叶片喷施不同浓度的ABA,低温胁迫3天后调查3种抗寒相关生理指标,经差异显著性分析得到外源喷施ABA最适浓度为200ul/L.(2)在得到适宜浓度的基础上,进一步探讨了外源喷施ABA对番茄幼苗抗冷性的影响,结果表明,在200ul/L的ABA预处理番茄幼苗后,随冷胁迫时间延长,叶片内游离脯氨酸和可溶性物质含量均逐渐升高,在同一胁迫时期的抗氧化酶活性和叶绿素含量高于CK,而MDA含量低于CK。(3)通过cDNA-AFLP技术分析外源ABA喷施番茄幼苗的抗冷性相关差异表达基因。共分成4组处理:清水+低温处理(CK);清水(CK1);200ul/LABA处理(CK2);200ul/LABA+低温处理(A3),混合时间点后提取每组的总RNA,将合成cDNA后进行AFLP分析,最后获得有效的差异条带50条,经Blast分析得知这些基因的功能包括信号转导﹑细胞代谢﹑转录调控﹑基因合成与修饰等。其中一些TDF序列所代表的基因序列与MYB﹑NAC﹑锌指蛋白这些转录因子相似,这些转录因子在调控植物抗逆中具有重要作用。(4)在差异条带中选取部分与抗冷相关的TDF条带,通过Real-time PCR验证其与ABA的关系,然后对目的基因的相对表达量分析,TDF35、TDF37、TDF41、TDF47的表达量都出现上升趋势,其中,TDF38、TDF41两个基因在ABA预处理后表达量上升显著高于CK,这与上述试验结果相符。
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