小鼠Dnajc5b和Rcet1基因是我们克隆的分别在小鼠睾丸和生殖域特异表达的新基因。Dnajc5b是DNAJ(HSP40)的同源物,亚家族C,成员5中的第二个,故命名Dnajc5b,该基因位于小鼠第三号染色体,含五个外显子,总长度为947bp,开放阅读框为597bp,共编码199个氨基酸。通过多组织RT-PCR检测,Dnajc5b在小鼠睾丸组织中特异表达;小鼠睾丸不同时期RT-PCR检测出,Dnajc5b在小鼠出身后第一周、第二周弱表达,第三周开始表达增强,第八周性成熟时表达最大。同时,原位杂交结果表明,Dnajc5b基因在小鼠精原细胞中特异表达。pEGFP-C3/Dnajc5b转染实验表明Dnajc5b蛋白在细胞质中表达。Dnajc5b原核表达得到了25KD左右的融合蛋白,利用His抗体通过Western Blot检测正确;同时对Dnajc5b融合蛋白进行分离纯化,得到纯化后的Dnajc5b蛋白,经6his抗体检测正确。通过点突变内含子和外显子之间的剪接位点gt和ag,致使内含子无法剪切而得不到成熟的mRNA,本实验室得到了敲除Rcet1的小鼠模型;检测结果表明:敲除Rcet1雄性小鼠完全不育;睾丸和附睾不能正常发育,睾丸萎缩,附睾囊肿;曲精小管中精母细胞核变大、出现多核细胞、精子严重不足;附睾管管腔变大、柱状细胞脱落、精子数量极少。Dnajc5b研究表明,Dnajc5b在睾丸组织中特异表达,其表达量与睾丸发育时期呈正相关;由于Dnajc5b含有Dnaj结构域和HSP40的结构位点,其亚细胞定位在细胞质中,Dnajc5b可能具有分子伴侣或热休克蛋白的功能。Rcet1敲除小鼠表明,缺乏Rcet1的小鼠睾丸和附睾不能正常发育,显示少精或者无精,表现为雄性不育。本文对Dnajc5b和Rcet1的研究结果,为进一步研究其生精过程中的分子机制打下了一定的基础。