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目的：制备不同分子量片段的银耳寡糖，对其进行理化性质和化学结构研究，并考察不同分子量的银耳寡糖对HK-2细胞的影响。方法：本实验采用酸水解、水解产物以醇沉法制备多糖和寡糖的混合物，混合物通过透析进行分离和通过717强碱型阴离子交换树脂和732强酸型阳离子交换树脂混合柱除盐，得到寡糖部分（TO-1）。通过糖含量测定（苯酚-硫酸法）、酸性糖含量测定（间羟基联苯法）、蛋白质含量测定（BCA试剂盒法）和PMP柱前衍生化，对其理化性质和单糖组成进行了分析；采用葡聚糖凝胶G-15色谱柱对TO-1进行分离，以HPLC方法对分离结果进行检测，得到了不同分子量的两个部分，分别对这两个部分进行理化性质测定和单糖组成分析；并考察了不同分子量片段的银耳寡糖对HK-2细胞的影响；采用LC-MS连用技术分析样品TO-1，分析其中寡糖的组成；同时对TO-1进行衍生化，制备成部分甲基化部分乙酰化的糖醇衍生物，通过GC-MS分析了其糖苷键的连接方式。结果：三种不同分子量银耳寡糖的理化性质为：TO-1的中性糖含量约为33.99%，酸性糖含量约为7.05%，蛋白含量约为10.5%；TO-1-1的中性糖含量约为91.54%，酸性糖含量约为15.95%，蛋白含量约为10.91%；TO-1-2的中性糖含量约为45.04%，酸性糖含量约为5.39%，蛋白含量约为11.87%。HPLC法分析结果表明，三种不同分子量片段的银耳寡糖均由Man、Glu和GlcA组成；通过LC-MS分析可知，样品TO-1是由2到9个糖残基组成的寡糖混合物；GC-MS结果表明, TO-1主要以1→3连接的Man为主，存在少量的1→6和1→2连接，分子量较大的寡糖以1→3连接的Man为主链，在其2位具有由Man构成的侧链，末端主要是由Glu和Man构成，TO-1中葡萄糖醛酸为非还原末端。不同分子量的银耳寡糖对HK-2细胞均有促进增殖作用，并且随着时间的延长，增殖作用越显著，分子量范围在230-1700D的银耳寡糖对HK-2细胞增殖作用没有差异。结论：采用酸水解、醇沉法对银耳部分酸水解产物进行制备,经过分离纯化得到银耳寡糖，通过LC-MS和GC-MS初步分析了银耳寡糖的化学结构，并通过MTT法检测不同分子量的银耳寡糖对HK-2细胞的影响，对寡糖的研究具有重要意义。