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目的：评价显微外科在治疗梗阻性无精子症中的应用价值,明确梗阻时间与精道重建术后复通率、精液常规各项指标和受孕率之间的关系。方法：回顾性分析2005年1月-2009年5月应用显微外科手术治疗35例梗阻性无精子症的患者。分析梗阻时间与精液常规和受孕之间的关系。结果：梗阻性无精子症显微外科术后复通率为94.3%(33／35),总受孕率为51.4%(18／35)。比较受孕率和复通率,受孕率明显低于复通率。按术后是否使妻子受孕分为受孕组和未受孕组,受孕组的精液量(t=2.0823,P<0.05),精子密度(t=2.7147,P<0.05)、精子活动率(t=2.1982,P<0.05)、正常形态精子(t=6.6762,P<0.01)明显高于未受孕组；而年龄,配偶年龄和梗阻时间在受孕组和未受孕组之间比较无统计学差异。根据梗阻10年以下和10年以上分成两组。10年以下组的精液量(t=5.7390,P<0.01),精子密度(t=5.9538,P<0.01)、精子活动率(t=3.6776,P<0.01)、正常形态精子(t=3.9357,P<0.01)明显高于10年以上组。受孕率的随着梗阻时间延长有下降趋势。Logisti回归分析显示精子密度(OR：1.1079,95%CI：1.0157-1.2084,P<0.05),精子存活率(OR:1.1094,95% CI:1.0000-1.2308,P<0.05)和正常形态精子率(OR:1.4805,95% CI:1.0574-2.0729,P<0.05)对生育力恢复有显著性意义。结论：(1)显微外科是治疗梗阻性无精子症的有效方法。(2)显微外科术后,自然受孕率明显低于再通率。(3)精子密度、精子活动率、正常形态精子和受孕率随着梗阻时间延长降低。精子活动率、正常形态精子率是影响术后生育力的最主要因素。目的：模拟输精管结扎和输精管再吻合术,研究梗阻性无精子症对睾丸生精功能的影响,探索Wistar大鼠梗阻性无精子症与精道重建动物模型的建立方法。方法：将90只雄性Wistar大鼠随机分成6组(n=15),平均体重(250±20)g。在水合氯醛腹腔麻醉后,经腹腔行输精管结扎术。第1-3组分别在输精管结扎术后1个月、2个月、4个月后对睾丸标本进行组织切片HE染色光镜检查。第4-6组分别于输精管结扎术后1个月、2个月、4个月,在水合氯醛腹腔麻醉后,经腹腔行6针全层缝合法输精管再通术,术后1个月后行输精管造影,并对再通术成功的大鼠睾丸标本进行组织切片HE染色光镜检查。所有手术操作均在10倍显微镜下,运用显微器械完成。结果：全部大鼠术后饲养均无死亡,全部完成实验。六组大鼠睾丸HE染色光镜检查提示生精小管覆盖各级生精细胞和精子。三组精道重建组,输精管造影显示第4,第5和第6组双侧复通和单侧复通分别为12只和3只,10只和2只,8只和2只。三组总复通率分别为27／30(90%)、22／30(73.3%)和18／30(60%)。三组精道重建组的成功率应用卡方检验进行两两比较,第1组的总复通率明显高于第3组(P=0.015),三组的复通率差异有统计学意义(x2=7.13,P=0.028)。结论：(1)精道梗阻一定时间内睾丸的生精功能在组织病理学上无明显减退。(2)梗阻性无精子症行精道重建再通率随时间延长而下降。(3)经腹输精管结扎,显微镜下应用6针全层缝合法行输精管再通术,可以稳定建立大鼠梗阻性无精子症和精道重建模型,可以用于梗阻性无精子症和梗阻性无精子症精道重建术后的病理生理学研究。目的：研究精道梗阻对附睾蛋白的影响,探索精道梗阻影响精子成熟和获能的可能机制。方法：建立大鼠梗阻性无精子症的模型,分别于梗阻后1个月、2个月和4个月获取附睾,利用蛋白质二维电泳得到附睾差异蛋白,通过质谱技术及数据库检索确定候选蛋白,运用Western Blotting和Realtime PCR技术进一步鉴定差异蛋白并分析表达规律。结果：(1)蛋白质二维电泳显示在梗阻后HE2、Fertilin、FA-1、Clusterin、CRISP1和ERABP成分和含量都发生了一定变化,而且不同梗阻时间的样本间也存在差异。(2)通过Western Blotting验证了3个差异点：HE2、FA-1和Clusterin蛋白,这3种蛋白的含量在梗阻后都有显著下降。(3)定量PCR的结果表明HE2基因的mRNA转录受到精道梗阻的影响。结论：(1)附睾功能蛋白含量的下降说明精道梗阻引起了附睾功能的变化。(2)促进精子成熟和获能的附睾蛋白HE2、Fertilin、FA-1、Clusterin、CRISP1和ERABP蛋白含量下降,并随梗阻时间延长含量有持续下降趋势,精道梗阻引起的附睾蛋白下降可能是精子受精力下降的原因。(3)精道梗阻后引起的HE2蛋白的改变是由基因转录的改变引起,说明精道梗阻能调节附睾蛋白基因的转录。目的：研究输精管梗阻对附睾蛋白的影响,探索精道重建术对精子成熟和获能影响的可能机制,探索精道重建与梗阻时间的时效关系的可能机制。方法：建立大鼠精道梗阻模型,分别于梗阻后1个月、2个月和4个月施行精道重建术,并于1个月后获取附睾,利用蛋白质二维电泳得到附睾差异蛋白,通过质谱技术及数据库检索确定候选蛋白,运用Western Blotting和Realtime PCR技术进一步鉴定差异蛋白并分析表达规律。结果：(1)蛋白质二维电泳显示精道重建术后附睾的蛋白质成分和含量都发生了一定变化,其中Hyaluronidase PH-20蛋白含量不变,Fertilin, FA-1, CRISP1和ERABP持续下降,HE2和Clusterin含量回升,而且不同梗阻时间后精道重建的样本间也存在差异。(2) Hyaluronidase PH-20蛋白,这种蛋白的表达在精道重建前后没有显著变化。(3) Western Blotting及定量PCR的结果表明HE2基因在精道重建术后再次受到了mRNA水平的调控,一定程度上恢复了蛋白含量,但是这种恢复在精道梗阻短期内比较明显(结扎1个月和结扎2个月),长期结扎(结扎4个月)后则很难恢复。结论：(1)精道重建手术能使部分附睾蛋白得到一定的恢复,精道梗阻时间越短,附睾蛋白恢复越好。(2)附睾蛋白恢复与梗阻时间的时效关系可能是精道重建术后生育力恢复与梗阻时间的时效关系的原因,而HE2蛋白可能在其中起到重要作用。