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目的:本实验应用两种不同的冷冻方法冻存小鼠卵巢组织进行冷冻并解冻后自体移植,然后比较各组冷冻前、解冻后及移植后卵巢组织内卵泡的形态改变以及Ang-2和Tie-2的表达。 方法:以小鼠为研究对象,将90只小鼠随机分为3组,每组各30只。由于实验过程中操作问题,剩余74只小鼠纳入结果(其中A组27只,B组23只,C组24只)。A组为对照组,B组、C组为实验组。A组将卵巢组织取下后直接移植于颈后部,B组将取下的卵巢组织以慢速程序化冷冻方法冻存21天后再进行自体移植,C组将取下的卵巢组织以玻璃化冷冻方法冻存21天后再进行自体移植。三组小鼠均在移植21天后将移植的卵巢组织取下。将刚取下的新鲜卵巢组织(三组)、解冻后(B组和C组)、移植后的卵巢组织(三组)进行HE染色及免疫组化,各组HE染色组织学观察各级卵泡形态学改变以及免疫组织化学法观察Ang-2及Tie-2的表达。 结果: 1. A组:移植后各级卵泡形态正常率均明显低于移植前(P<0.05)。B组:冷冻前与解冻后相比,始基卵泡形态正常率差异无统计学意义(P>0.05 );解冻后窦前卵泡、窦卵泡形态正常率均低明显于冷冻前(P<0.05 )。C 组:解冻后各级卵泡形态正常率均明显低于冷冻前(P<0.05)。B组、C组移植后各级卵泡形态正常率均明显低于冷冻前和解冻后(P<0.05)。冷冻前A、B、C三组间各级卵泡的形态正常率差异无统计学意义(P>0.05)。解冻后B组始基卵泡形态正常率明显高于C组(P<0.05 ),A组各级卵泡形态正常率于移植后明显高于B组和C组(P<0.05);B组和C组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。 2. 无论在颗粒细胞还是卵泡膜细胞,A组新鲜卵巢Ang-2、Tie-2的阳性表达均明显高于移植后(P<0.05),B组、C组解冻后均明显低于冷冻前(P<0.05),移植后明显低于冷冻前和解冻后(P<0.05)。A、B、C三组相比,冷冻前Ang-2、Tie-2的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)。B组于 解冻后Ang-2、Tie-2阳性表达均明显高于C组(P<0.05),A组于移植后Ang-2、Tie-2阳性表达均明显高于B组、C组(P<0.05);B组和C组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 结论: 1. 无论用何种冷冻方法,相比于于窦前卵泡和窦卵泡,冷冻对始基卵泡的损伤最小,始基卵泡更易耐受冷冻,而且慢速程序化冷冻对各级卵泡的损伤小于玻璃化冷冻。 2. 卵巢组织冷冻过程会影响Ang-2和Tie-2的表达,冷冻对血管生成会产生影响,慢速程序化冷冻对Ang-2和Tie-2的影响小于玻璃化冷冻。 3. 无论是否经过冷冻,移植过程均会对对卵泡产生损伤,同时影响血管再生过程。