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背景结直肠癌作为世界第三高发恶性肿瘤,是威胁人类健康的重要公共卫生问题。揭示结直肠癌的复杂发病机制,是肿瘤研究领域的前沿问题。MicroRNAs是一类高度保守的小分子非编码RNA,通过抑制特定的癌基因或抑癌基因,在肿瘤的发生发展中起着重要作用,已成为一个新的研究热点。有文献报道miR-1260b在多种实体瘤中异常表达,参与肿瘤发生发展。然而miR-1260b在结直肠癌增殖和侵袭中的生物学功能及相关机制尚未完全阐明。目的探究miR-1260b对结直肠癌细胞增殖、侵袭等生物学功能的影响,预测和验证miR-1260b下游靶基因及相关分子机制。方法1.利用荧光定量PCR检测miR-1260b在结直肠癌组织和细胞中的表达情况;2.将miR-1260b inhibitor转染至RKO和SW620细胞株,通过CCK-8法、平板克隆形成和Transwell体外侵袭实验,检测抑制miR-1260b表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭能力的影响;3.利用生物信息学数据库MiRanda、TargetScan、DIANA-microT、PicTar和MICROCOSM对miR-1260b的靶基因进行预测,挑选交集较多且预测值较高的基因,即TSC22D2作为候选靶点,并利用双荧光素酶报告基因和western blot验证;4.将miR-1260b和TSC22D2共转染至SW480和HCT116细胞株中,利用CCK-8法、平板克隆形成和Transwell实验,进一步检测miR-1260b过表达及靶基因TSC22D2回复后对结直肠细胞增殖和侵袭能力的影响。结果1.miR-1260b在结直肠癌组织中的表达量高于正常粘膜组织(P<0.05),且伴有淋巴结或远处转移的组织中表达量显著高于不伴转移的组织(P<0.05);结直肠癌细胞系中miR-1260b表达显著高于正常肠粘膜上皮细胞系(NCM460)(P<0.001),其中,miR-1260b在结直肠癌细胞系SW620、RKO、Caco2、HT29、HCT116、SW480细胞系中表达量逐渐降低。2.生物信息学预测TSC22D2为miR-1260b的候选靶基因;双荧光素酶报告基因显示在SW620和HCT116细胞系中同时转染miR-1260b和TSC22D2-3’UTR-WT载体后荧光素酶活性显著降低(P<0.001,P<0.001),且Western blot结果显示TSC22D2蛋白表达量与miR-1260b表达水平呈负相关。3.CCK-8实验结果显示miR-1260b inhibitor转染的细胞增殖速度显著下降(均P<0.05),miR-1260b过表达的细胞增殖速度显著增加(均P<0.05),而miR-1260b/TSC22D2共转染组与miR-1260b组相比细胞增殖能力明显减弱(均P<0.05)。4.平板克隆实验结果表明,miR-1260b inhibitor组细胞克隆形成能力显著降低(P=0.001,P=0.003),miR-1260b组细胞克隆形成能力显著增加(P<0.001,P<0.001);与miR-1260b组相比miR-1260b/TSC22D2组细胞克隆形成能力被部分抑制(P<0.001,P<0.001)。5.Transwell细胞侵袭实验结果显示,miR-1260b inhibitor组穿膜细胞数目显著减少(P<0.001,P<0.001),miR-1260b组穿膜细胞数目显著增加(P<0.001,P=0.002),而与miR-1260b组相比miR-1260b/TSC22D2组穿膜细胞数目显著减少(P<0.001,P<0.001)。结论miR-1260b在结直肠癌中表达上调,并通过抑制靶基因TSC22D2促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭的能力。