降钙素原是人体一种糖基化蛋白质,因其特异性好、灵敏性高而成为临床检测细菌感染、脓毒症和败血症等疾病的一项重要指标。本文采用昆虫杆状病毒表达系统及大肠杆菌表达系统分别重组表达人降钙素原(PCT)。人工合成降钙素原基因,与转移载体PFastBacTM1连接,构建重组质粒pFB1-PCT并双酶切鉴定；将pFB1-PCT质粒转化至DH10Bac感受中进行同源重组,得到重组杆状病毒载体Bacmid-PCT,抽提质粒并进行PCR鉴定。用脂质体法将Bacmid-PCT转染sf9细胞,扩增病毒并感染sf9细胞表达PCT,采用Western-blot进行鉴定。将人工合成降钙素原基因与PET-22b表达载体连接,转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,优化重组降钙素原表达条件,使用镍离子亲和层析柱纯化目的蛋白,采用ELISA方法鉴定重组降钙素原的免疫原性。实验表明成功制备重组杆状病毒载体Bacmid-PCT, Western-blot表明重组PCT与抗小鼠PCT单抗能特异性结合；利用昆虫杆状病毒表达系统在sf9细胞中重组表达人降钙素原,且具有免疫原性。利用PET-22b表达载体在大肠杆菌表达系统BL21(DE3)中表达PCT融合蛋白,并纯化得到高浓度的可溶性PCT,纯度达85%。利用市售PCT抗体,建立了ELISA检测方法。本文实验结果为将来利用PCT作为监测术后细菌感染等此类疾病提供了技术基础和应用基础。