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目的：探讨急性白血病细胞免疫治疗的新途径。将树突状细胞(dendritic cells, DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells, CIK)一起孵育,观察共培养物DC细胞与CIK细胞的增殖能力、免疫膜标变化、分泌细胞因子水平以及抗急性白血病细胞的效应。同时与CIK细胞单独培养的生物学活性和抗白血病作用相比较,为白血病治疗寻找一种更理想的免疫活性细胞。方法：CIK细胞的体外培养。采取正常健康人的外周血,经肝素抗凝后,用H-F(Hypaque-Ficoll)淋巴细胞分离液相对密度为1.077±0.001,分离获得单个核细胞(mononuclearn cells, MNC)。然后用RPMI 1640培养液洗涤3次,调整细胞浓度至4×106／ml,进行贴壁细胞培养,收集悬浮的细胞,用含10%小牛血清(fetal calf serum, FBS) RPMI 1640液将细胞浓度调整至1×106／ml,经37℃、5%C02培养,分别于第0天、第1天加入不同的细胞因子,以后每隔3天更换新的培养液。3天后更换培养液的同时补充加入重组人白细胞介素-2(rh-interleukin-2, rhIL-2)。DC细胞的体外培养方法是通过将健康人外周血单个核细胞,用RPMI1640培养液调整细胞浓度为4×106／ml,培养1到2小时,吸弃培养基及悬浮的细胞,在培养瓶中加入新鲜的RPMI1640培养液,反复吹吸使贴壁细胞悬浮。收集悬浮贴壁细胞,离心洗涤,进行细胞计数,调整细胞浓度为1×106／ml。然后用含有10%的FBS的RPMI 1640培养液培养,培养液中同时加入重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rh-granulocyte-macroph-age.colony-stimulating.factor,rhGM-CSF) 550 U/ml、重组人白细胞介素-4(rh-interleukin-4, rhIL-4) 500U/ml。按照常规培养,隔日半量换液,并补加细胞因子。于培养72小时前再加入重组人肿瘤坏死因子-a(rh-tumor necrosis factor-a, rhTNF-a) 50U/ml,诱导DC细胞的成熟。将获培养第9天的DC细胞及CIK细胞经台盼蓝排斥法活细胞计数后,用含有10%FBS的RPMI1640液调整细胞浓度,调整DC细胞浓度为1×106／ml,CIK细胞浓度为5×106／ml,按照DC细胞与CIK细胞之比为1：5的比例将两者混合培养,培养至第3天与第6天收集共培养的细胞,进行生物学活性测定。结果：研究结果表明,DC细胞与CIK细胞共培养后,其细胞增殖能力、细胞毒活性、免疫表型的表达、细胞因子分泌水平与单独CIK细胞相比有明显或显著性差异。结论：与DC细胞共培养可以提高CIK细胞的增殖速度；DC细胞可增强CIK细胞的杀伤活性,在同一效靶比对急性白血病细胞的杀伤活性各型之间无明显差异,随着效靶比的增高对急性白血病细胞的杀伤活性增强；共培养细胞CD3+CD8+及CD3+CD56+双阳性细胞比值明显高于同条件下单独CIK细胞培养组；共培养细胞分泌细胞因子水平较单独CIK细胞培养组分泌水平高。