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为探讨东北梅花鹿性周期内卵巢活动规律及生殖激素调控卵泡发育成熟和排卵的模式,以及为进一步揭示母鹿繁殖机理提供理论依据实施了本试验。试验选择4~5周岁、2~3产的健康东北梅花鹿共89只,其中16只选自繁殖(6~8月)和非繁殖(9~10月)季节,手术取出卵巢后采用MOTIC SFC-18型光学显微镜利透射电子显微镜(JEM-1200E型,日本生产;TEICANA荷兰生产)进行卵巢和卵泡的显微和超显微组织学研究;在繁殖季节共对69只鹿采用SN-695B型智能放免γ测定仪测定血液中FSH、LH、E2和P4的含量,以研究生殖激素的变化规律;采用B-型超声波诊断仪对在繁殖季节的4只鹿进行卵巢形态和卵泡发育的超声影像学研究。采用统计学分析软件SPSS11.0对所得数据进行比较分析;研究结果表明:1.卵巢组织由生殖上皮、白膜、皮质和髓质构成,生殖上皮为单层立方或柱状,白膜由缔组织构成,皮质部在卵巢的外周,间质腺不发达。皮质中分布着各级卵泡,有原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡和成熟卵泡。上述各级卵泡中的卵母细胞和卵泡细胞直径分别是:27.72±7.35μm和37.09±6.89μm,43.12±14.92μm和86.18±20.47μm,85.125±17.39μm利284.59±93.82μm,103.05±9.93μm和993.61±542.05μm,127.5±3.54μm和3500±2765.36μm。卵巢B-超影像学特征为:稍扁,多呈椭圆形,边缘光滑清晰,界限明显。在发情周期内,有大小不一的发育卵泡和黄体;卵泡显示为无回声的团状黑影;黄体为均匀的深灰色细小颗粒组成,退化后成为强反射。2.卵泡在发育过程中,卵泡细胞形成的突起与卵母细胞始终保持密切的联系:卵母细胞从原始卵泡到直径1.5~3mm的三级卵泡,细胞质中线粒体数量由少到多,线粒体内的嵴不断增加,高尔基体由不典型到变成典型,皮质颗粒由开始形成到形成较多的皮质颗粒,并逐渐地迁移到卵母细胞膜下。在发情周期中,卵巢上小卵泡、中等卵泡和大卵泡的比率分别为92.51%(92.51±5.87)、4.60%(4.60±4.91)和2.88%(2.88±2.22),成熟卵泡的直径平均为7.17(7.17±3.1)mm;小卵泡是卵泡发育的基础,各类卵泡在整个发情周期的数量和直径均存在着动态变化,有较稳定的分布。3.卵泡闭锁发生于卵泡生长的各个时期:原始卵泡和次级卵泡闭锁较简单,为卵母细胞首先表现出退行性变化、皱缩;卵泡细胞核固缩、卵泡变形。三级卵泡的闭锁分为早期、中期和后期三个时期。4.透明带物质出现于3~4层卵泡细胞包围卵母细胞时,开始出现短而粗的微绒毛;而当卵泡细胞在4层以上时形成一层薄而完整的透明带,同时微绒毛变得密集而细长;到三级卵泡(1.5~3mm)时,微绒毛开始缩短变粗,部分退出透明带。5.发情周期中,在排卵后第5d,卵巢上可见到黄体,平均直径为4.5mm×7.5mm,排卵前第4~7d黄体发育到最大,平均为9.3mm×14mm,排卵前2~3d黄体直径平均为4.0mm×6.0mm。6.断乳后2~44d,血清中FSH、LH、E2和P4的平均含量分别为:2.01±0.08mIU/ml、4.66±0.17mIU/ml、4.47±1.11pg/ml和0.48±0.12ng/ml。其中,FSH在第8d出现峰值(2.73±0.14mIU/ml);LH在第8d显著升高达4.92±0.97mIU/ml,然后呈现一定的不规则波动;E2在第5d出现峰值(34.55±15.25pg/ml);P4由第2d的0.67±0.05ng/ml,到第11d时明显的下降到0.45±0.06ng/ml(p<0.05),之后没有明显的变化(p>0.05)。7.发情前16d到发情后6d内,血清中FSH、LH、E2和P4的平均含量分别为:2.62±0.08mIU/ml、6.46±0.23mIU/ml、3.38±0.24pg/ml和0.61±0.03ng/ml。其中,FSH从第16d到10d缓慢升高,到第10d达2.89±0.21mIU/ml(p<0.05),然后处于平稳状态,直到发情后的第6d;LH从第12d开始缓慢上升,到发情时达到峰值,发情后第2d又明显下降,之后没有明显变化(p>0.05);E2在第8d和第2d分别出现一个峰值(p<0.05或p<0.01),在发情当天显著下降(p<0.01),到发情后第2d下降到最低;P4从第16d缓慢上升,到第6d达峰值,在发情当天降为最低,在发情后第2d显著升高达0.84±0.16ng/ml(p<0.05),之后,保持平稳。8.在发情的24h内,各时间上FSH、LH、E2和P4含量没有明显变化(p>0.05),并且与发情当天没有显著差异(p>0.05)。平均分别为:2.41±0.10mIU/ml、4.70±0.51mIU/ml、1.12±0.16pg/ml和0.53±0.03ng/ml。9.妊娠早期(2~38d)FSH、LH、E2和P4的平均含量分别为1.60±0.66ng/ml、3.272.99mIU/ml、6.47±4.28pg/m和0.05±0.04ng/ml;其中,FSH从妊娠开始稳步上升,但在第4d和第14d出现两个低峰,在第20d出现一个最低值(0.93±0.88mIU/ml),然后迅速上升,达到最高值(2.14±0.50mIU/ml)后维持在较平稳的水平上;LH从妊娠开始呈现缓慢下降的趋势,并一直处于低稳的水平,LH各峰值之间无显著性差异(P>0.05);E2除在第8d出现一个较大的峰值外,一直都是稳步降低;P4从妊娠开始逐渐增加,至20d开始下降,到第26d降到最低值,然后开始迅速上升,在第34d出现一个最高值(0.14±0.037ng/ml)后呈下降趋势。10.在麻醉、驱赶进吊圈保定和多次驱赶进吊圈保定三种不同刺激强度下,发情雌鹿血清中LH、P4、FSH和E2的浓度分别为3.06±0.21mIU/ml、6.57±0.25mIU/ml和8.83±1.90mIU/ml,0.42±0.12ng/ml、0.56+0.38ng/ml和0.54±0.15ng/ml,2.62±0.11mIU/ml、2.86±0.13mIU/ml和2.55±0.29mIU/ml,1.35±0.32pg/ml、2.78±1.04ng/ml和3.39±1.13ng/ml;其中,LH随着刺激强度的增加而升高;P4在麻醉条件下明显低于其它两种刺激条件下的浓度;而FSH和E2在不同刺激条件下没有明显的差异。在强应激刺激下(多次驱赶吊网保定),雌性梅花鹿的发情被严重的抑制。