本文对动物性食品中喹诺酮类药物多残留的直接竞争酶联免疫检测方法进行了系统的研究。选择4种喹诺酮类药物诺氟沙星(Norfloxacin，NOR)、环丙沙星(Cipfloxaxin，CIP)、沙拉沙星(Sarafloxacin，SAR)、氧氟沙星(Ofloxacin，OFL)用活化酯法与BSA偶联制备人工免疫原，通过免疫纯化获得广谱的抗喹诺酮药物多克隆抗体OFL-B和NOR-B，优化了抗体包被量、酶标抗原量、封闭液、封闭时间和竞争时间，建立了OFL-B和NOR-B抗体的直接竞争酶联免疫检测方法，OFL-B抗体可以同时检测氧氟沙星、麻保沙星、氟罗沙星3种喹诺酮类药物的残留，NOR-B抗体可以同时检测16种喹诺酮类药物的残留，对所建立的方法的各种性能指标进行了系统评价，考察了定量限、方法检测限、准确度、精密度。OFL-B抗体所建立的直接竞争酶联免疫法的灵敏度为0.20 ng/mL，检测限为0.02ng/mL，以牛奶为例，研究了牛奶基质影响的消除方法，1mL牛奶加入2mL7.5％三氯乙酸，离心，用PBS稀释70倍即可有效消除基质影响，测定了200、100、50、20、10 ng/mL五个浓度的添加回收率，回收率在78-113％之间，可用来同时检测氧氟沙星、麻保沙星、氟罗沙星三种喹诺酮类药物;通过高效液相色谱法，对建立的氧氟沙星的直接竞争酶联免疫法的准确性进行了验证，两种方法的检测结果一致性很高，说明所建立的直接竞争酶联免疫法准确可靠。同时，NOR-B抗体所建立的直接竞争酶联免疫法的灵敏度为0.73 ng/mL，检测限为0.04 ng/mL，牛奶经三氯乙酸处理以后稀释20倍消除基质影响，测定了200、100、50 ng/mL三个浓度的添加回收率，回收率在69.3-107.3％之间，可同时检测十六种喹诺酮类药物的残留。