第一部分多囊卵巢综合征胰岛素抵抗风险因子一、炎性因子和趋化因子在PCOS血清中的表达目的比较炎性因子和趋化因子在PCOS患者和正常对照血清中的水平。方法24例PCOS患者根据BMI分成2组：PCOS非肥胖组（PCOS nob组，其BMI＜25Kg／m²）和PCOS肥胖组（PCOS_ob组，其BMI≥25Kg／m²），每组各12例，12例规律月经、基础体温双相的正常人作为正常对照组，用酶联免疫的方法测定三组对象血清中TNF-α、C反应蛋白（C-reactive protein CRP）、MCP-1、IL-8和RANTES的水平，用方差分析（LSD）和独立样本t检验分析三组之间平均表达水平的差异。结果PCOS_nob组和PCOS_ob组血清中TNF-α的浓度分别为26.36±2.88，33.21±6.59pg／ml（Mean±SD），高于对照组15.08±9.60 pg／ml，差别有显著性统计学意义（P均小于0.01）；PCOS_nob组和PCOS_ob组血清中CRP的浓度分别为0.38±0.04、0.27±0.07μg／ml，与对照组（0.26±0.06μg／ml）没有差别（P＞0.05）；PCOS_nob组血清中MCP-1的浓度为126.11±56.81pg／ml，与对照组（106.08±30.81 pg／ml）没有差别（P＞0.05）；PCOS_ob组血清中的MCP-1的浓度183.85±40.02 pg／ml，高于对照组106.08±30.81pg／ml，差异有显著统计学意义（P＜0.01）：PCOS_nob组和PCOS_ob组血清中的IL-8的浓度分别为518.27±257.60和731.52±503.00 pg／ml，均高于对照组(130.93±127.67 pg／ml，差别有显著统计学意义（P＜0.01）；PCOS_nob、PCOS_ob组和对照组血清中的RANTES的浓度分别为41.75±10.54、40.62±15.42和47.93±15.65，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论非肥胖型和肥胖型PCOS患者血清中TNF-α、IL-8表达均升高，MCP-1在肥胖型PCOS患者血清中升高。二．PCOS患者中性激素结合蛋白和总睾酮与胰岛素抵抗的相关性研究及风险值目的分析性激素结合蛋白（sex hormone bingding globulin SHBG）和总睾酮（total testosterone TT）与PCOS患者胰岛素抵抗（insul in resistance IR）和代谢紊乱的相关性。方法344例PCOS作为研究对象，100例月经规律、基础体温双相的妇女作为对照组，比较PCOS患者SHBG和TT与正常对照的差异，分别分析SHBG和TT与BMI、WHR、胰岛素、血糖和血脂的相关性；Logistic回归分析了年龄、卵巢体积、LH、FSH、LH／FSH比值、总睾酮、SHB6、DHAS、催乳素和皮质醇对IR（HOMA-工R≥1.66）的影响，并作SHBG对IR的ROC曲线，获得预测IR的界定风险值；并比较SHBG水平不同的患者的糖脂代谢紊乱的程度。结果PCOS患者的SHBG低于正常对照组（114.03±88.45 vs 201.05±105.76mmol／L，P＜0.01），TT高于正常对照组（0.81±0.28 vs 0.49±0.18ng／dl，P＜0.01）；SHBG与胰岛素、血糖、HOMA-IR、TG、BMI和WHR呈负相关（P均小于0.01），TT与空腹胰岛素（P＜0.01）、胰岛素释放试验₁hr、₂hr、₃hr、以及相应的曲线下面积、HOMA-IR呈正相关（P＜0.05）。Logistic回归分析发现SHBG是PCOS IR的独立危险因素（OR 3.741）。ROC曲线得到SHBG预测IR大致风险值是88mmol／L（95％CI：0.668～0.774）。在低SHBG患者（SHBG＜88mmol／L）中，胰岛素、血糖高于高SHBG患者（SHBG≥88mmol／L）（P＜0.01），甘油三酯也高于高SHBG组（P＜0.05）。结论在PCOS患者中，TT高于正常对照，SHBG低于正常对照；TT与IR呈正相关，SHBG与IR呈负相关；SHBG是PCOS IR的独立风险因子。第二部分多囊卵巢综合征二甲双胍治疗干预研究一．PCOS二甲双胍治疗干预对生殖内分泌和糖脂代谢影响的临床研究目的研究二甲双胍治疗对PCOS生殖内分泌和糖脂代谢调节的临床疗效。方法140例PCOS患者根据体块指数分成PCOS_nob组和PCOS_ob组，并分别对PCOS_nob组和PCOS_ob组各自随机分组分为干预对照组（MPA组）和干预组（Met组），干预对照组采用安宫黄体酮周期疗法，干预组用二甲双胍治疗，观察过程中若没有排卵加用安宫黄体酮治疗；另外收集30例月经规律、基础体温双相的妇女作为正常空白对照，共观察6个月，评估二甲双胍治疗6个月对PCOS患者的人体测量指标、生殖激素、糖脂代谢的影响。结果PCOS nob MPA组和PCOS_ob_MPA组的人体测量指标、生殖激素和糖脂代谢指标在治疗前后改变无差别；PCOS_ob_Met组的BMI下降，分别为28.35±4.11 vs 26.65±3.99（P＜0.01），多毛评分下降（7.46±3.42 vs 5.41±2.43，P＜0.01）；LH／FSH比值下降（1.78±0.67 vs 1.39±0.58，P＜0.01）；PCOS-nob_Met组和PCOS_ob_Met组的TT均下降（0.87±0.24 vs 0.70±0.21，0.88±0.25 vs 0.67±0.22 ng／ml，P＜0.01），SHBG上升（97.61±61.74 vs 151.38±78.74，71.26±48.11 vs 104.22±66.81mmol／L，P＜0.01），FAI降低（5.99±6.66 vs 2.25±1.61，6.03±5.29vs 3.04±2.64，P＜0.01），FINS降低（7.66±3.51 vs 5.06±2.10mmol／L，P＜0.01；19.01±21.32 vs 10.00±6.09，P＜0.01），胰岛素释放试验的胰岛素曲线下面积（IAUC）下降（173.49±84.01 vs 145.57±60.35，338.33±199.53 vs201.74±106.19mmol.h／L，P＜0.01），PCOS_ob_Met组的OGTT血糖曲线下面积下降（18.96±3.48 vs 17.64±3.36mm01.h／L几，P＜0.01），PCOS_nob_Met组和PCOS_ob_Met组的HOMA-IR降低（1.40±0.69 vs 0.91±0.38，P＜0.01；3.78±4.70 vs 1.88±1.29，P＜0.05）；PCOS_ob_Met组的胆固醇下降（4.58±0.90vs 4.36±0.84mmol／L，P＜0.01），PCOS_nob_Met组的甘油三酯下降（1.57±0.89 vs 1.40±0.71，P＜0.05），PCOS_nob_Met组和PCOS_ob_Met组的低密度脂蛋白均下降（2.73±0.57 vs 2.33±0.43，2.95±0.57 vs 2.60±0.52，P＜0.01）。PCOS_nob_Met组和PCOS_ob_Met组的自主排卵率分别为66.67％（20／30）和40％（16／40），差别有统计学意义（P＜0.05）．结论6个月的二甲双胍治疗能有效改善PCOS患者的生殖内分泌激素和糖脂代谢紊乱，促进排卵功能的恢复。二．二甲双胍治疗PCOS机理的实验室研究（一）二甲双胍对血清中炎性因子的影响目的探讨PCOS二甲双胍干预治疗对血清中炎性因子水平的影响。方法48例PCOS患者根据体块指数分成PCOS_nob组和PCOS_ob组，并各自随机分为二组，：共有4组（每组12例）：PCOS_nob_MPA组和PCOS_ob_MPA组后半周期予安宫黄体酮控制月经周期：PCOS_nob_Met组和PCOS_ob_Met组予二甲双胍治疗，若排卵没有发生用安宫黄体酮控制月经周期；疗程6个月，并收集12例月经规律、基础体温双相型的妇女作为正常空白对照。观察二甲双胍对PCOS患者血清中TNF-α、IL-8和MCP-1的影响。结果TNF-α在PCOS_nob_MPA组和PCOS_ob_MPA组无改变（26.36±2.88 vs 23.82±4.22pg／ml，33.21±6.59 vs 30.20±5.15pg／ml，P＞0.05），在PCOS_nob_Met组和PCOS_ob_Met组下降（29.01±6.67vs 23.58±4.17pg／ml，35.58±8.03 vs 28.61±6.42pg／ml，P＜0.05）；IL-8在PCOS_nob_MPA组和PCOS_ob_MPA组无改变（518.27±257.59 vs 479.49±241.01pg／ml，731.52±502.97 vs 669.75±456.41pg／ml，P＞0.05），在PCOS_nob_Met组和PCOS_ob_Met组下降（541.49±218.30 vs 266.32±87.14pg／ml，720.65±485.84 vs 197.06±88.71pg／ml，P＜0.01）；MCP-1在PCOS_nob_MPA组和PCOS_ob_MPA组无改变（126.11±56.81 vs 121.76±53.40，183.85±40.02 vs 157.68±60.59pg／ml，P＞0.05），在PCOS_nob_Met和PCOS_ob_Met组下降（128.28±22.93 vs 105.02±30.06，197.42±80.39 vs122.60±58.13pg／ml，P＜0.01）。结论二甲双胍治疗可使PCOS血清中炎性因子TNF-α、IL-8和MCP-1水平下降。（二）PCOS患者红细胞膜胰岛素受体酪氨酸磷酸化异常及二甲双胍的调节作用目的了解红细胞膜胰岛素受体酪氨酸激酶区的三个酪氨酸残基pY1158、pYpY1162／1163在PCOS患者中的磷酸化情况以及二甲双胍治疗的影响。方法8例月经规律、基础体温双相型的妇女作为正常对照组，8例非肥胖PCOS患者列入PCOS_nob组，12例肥胖型PCOS患者列入PCOS_ob组，PCOS_nob组和PCOS_ob组予二甲双胍治疗；疗程3个周期。治疗前后各取二份外周血，分离红细胞后离体培养，其中一份未加用胰岛素刺激，另一份加用胰岛素（100nmol／L）刺激，超速离心获得红细胞膜裂解液，ELISA法测定二甲双胍治疗前后红细胞膜上胰岛素受体酪氨酸残基pY1158、pYpY1162／1163的磷酸化浓度和胰岛素β亚单位的浓度。结果①pY1158浓度在正常对照组均高于PCOS_nob组和PCOS_ob组（40.97±8.55 vs 28.53±9.24 Units／ml，40.97±8.55 vs 25.70±13.8l Units／ml，P＜均小于0.05）；用胰岛素刺激后，正常对照组、PCOS_nob组和PCOS_ob组的pY1158均较基础值上升（40.97±8.55 vs 47.85±14.07 Units／ml，28.53±9.24 vs 33.03±7.90 Units／ml，25.70±13.81 vs 31.29±14.94 Units／ml，P均小于0.05）；予二甲双胍治疗，nob组和Ob组的pY1158均较基础状态升高，差异有显著统计学意义（28.53±9.25 vs 40.86±10.52 Units／ml，25.70±13.81vs 31.67±18.06 Units／ml，P均小于0.01）；予二甲双胍治疗和胰岛素体外刺激，PCOS_nob组和PCOS_ob组的pY1158进一步较基础状态升高（28.53±9.25vs 50.07±12.74 Units／ml，25.70±13.81 vs 31.92±18.13 Units／ml，P均小于0.01）。②正常对照组pY1162／1163浓度与PCOS_nob组和PCOS_ob组差别无统计学意义（13.45±1.33 vs 14.38±1.72，13.45±1.33 vs 14.34±3.66Units／ml，尸均大于0.05），用胰岛素体外刺激后，对照组、nob组和ob组的pY1162／1163浓度上升均无统计学意义（13.45±1.33 vs 13.89±1.30，14.37±1.71 vs 15.25±2.08，14.34±3.66 vs 15.05±1.94 Units／ml，P均大于0.05）；予二甲双胍治疗，PCOS_nob组pY1162／1163浓度较基础状态升高，差异有显著统计学意义（14.37±1.71 vs 17.94±3.34Units／ml，P＜0.01），PCOS ob组也较基础状态升高（14.34±3.66 vs 15.63±3.21Units／ml，P＜0.05）；予二甲双胍治疗和胰岛素体外刺激，PCOS_nob组和PCOS_ob组的pY1162／1163浓度较基础状态进一步上升（14.37±1.71 vs 19.62±2.90 Units／ml，14.34±3.66vs 18.91±5.45 Units／ml，P均小于0.01）。③正常对照组IR-β亚单位浓度与PCOS-nob组和PCOS-ob组差别无统计学差异（1.89±0.33 vs 1.58±0.28ng／ml，1.89±0.33 vs 1.69±0.26ng／ml，P均大于0.05）；用胰岛素刺激后，正常对照组、PCOS-nob和PCOS-ob组患者IR-β浓度变化无统计学差异（1.88±0.33 vs 1.75±0.31ng／ml，1.58±0.28 vs 1.43±0.28 ng／ml，1.69±0.25 vs1.68±0.71ng／ml，P均大于0.05）；用二甲双胍治疗3个周期，PCOS-nob组和PCOS-ob组IR-β浓度改变亦无统计学差异（1.58±0.28 vs 1.34±0.25 ng／ml，1.69±0.25 vs 1.48±0.31ng／ml，P均大于0.05），予二甲双胍治疗和胰岛素体外刺激，PCOS-nob组和PCOS-ob组IR-β浓度改变亦无统计学差异（1.58±0.28vs 1.60±0.25 ng／ml，1.69±0.25 vs 1.52±0.51ng／ml，P均大于0.05）。结论PCOS胰岛素受体酪氨酸激酶区的pY1158的磷酸化下降；3个周期的二甲双胍治疗对PCOS患者胰岛素受体酪氨酸激酶区的pY1158、pYpY1162／1163的磷酸化均有升调作用，胰岛素受体的数目无明显改变，可能为二甲双胍改善PCOS IR的分子机制之一。（三）付氧磷酶在青春期PCOS中的活性和二甲双胍对PON-1的影响目的探讨付氧磷酶（Paraoxonase 1 PON-1）在青春期PCOS中的活性和二甲双胍治疗对其影响。方法30例青春期PCOS患者随机分为2组：PCOS MPA组（n=15），后半周期予安宫黄体酮治疗调整月经周期，PCOS_Met组（n=15），予二甲双胍治疗，若无排卵后半周期用安宫黄体酮控制月经周期；15例月经规律、非PCOS的正常青春期女孩作为正常空白对照组，疗程6个月；比较青春期PCOS患者血清中PON1的活性和评估二种方法对PON1的影响。结果正常空白对照组的PON1活性高于PCOS_MPA组（2.60±0.82 vs 1.62±1.38 Units，P＜0.05）和PCOS_Met组（2.60±0.82 vs 1.60±0.77 Units，P＜0.05），治疗后PCOS_MPA组无变化（1.62±1.38 vs 1.39±0.51UnitS，P＞0.05），PCOS_Met组升高（1.60±0.77 vs 2.52±0.92 Units，P＜0.01），并与正常对照组没有差别（2.52±0.92 vs 2.60±0.82Units，P＞0.05）。结论血清PON1活性在青春期PCOS患者中降低，二甲双胍治疗能可使PON1活性升高。