口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种T细胞介导的口腔粘膜的慢性炎性疾病。组织学上的特点主要表现为上皮下T淋巴细胞的带状浸润、基底膜的断裂以及基底细胞的液化变性。其病因尚未完全清楚,其病程慢性迁延,治疗已成为临床上相当棘手的一个问题。大量研究证实免疫因素在该病的发生发展过程中占主要地位。研究发现OLP发病是一个由T细胞介导的免疫损伤过程,与机体自身免疫功能有关。OLP病损区浸润的细胞主要是T淋巴细胞,其数量、分布、亚群比例及产物在病变局部发展中有着怎样的规律性变化?如何用药终止或逆转这些变化?这些问题成为研究重点。目的:本实验应用免疫组织化学技术,分别检测45例口腔扁平苔藓粘膜组织和16例正常口腔粘膜组织中CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、Th1细胞、Th2细胞的分布情况,应用RT-PCR技术、荧光实时定量PCR技术及计算机技术检测11例口腔扁平苔藓粘膜组织和5例正常口腔粘膜组织中IFNγ、IL-10的量的变化,初步探讨T淋巴细胞在口腔扁平苔藓发病过程中的作用,为临床上治疗口腔扁平苔藓提供新的思路。方法:1.收集临床及病理确诊的口腔扁平苔藓粘膜组织45例和正常口腔粘膜组织16例,将每个标本的八张连续切片分别进行HE染色、CD4免疫组化染色、CD8免疫组化染色、Th1细胞免疫组化染色、Th2细胞免疫组化染色、和阴性对照(3张)。根据免疫组化结果从蛋白水平观察CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、Th1细胞、Th2细胞在两种组织中的分布情况。2.收集临床及病理确诊的口腔扁平苔藓粘膜组织11例和正常口腔粘膜组织5例,应用PCR技术检测标本中IFNγ、IL-10的量,验证引物设计合成物无误后,进行荧光实时定量PCR,检测IFNγ、IL-10在两组中的量的变化。结果:1.免疫组化结果:与正常口腔粘膜组相比,口腔扁平苔藓粘膜组CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、Th1细胞、Th2细胞数目增多且分布有差异。CD4~+T淋巴细胞在口腔扁平苔藓中淋巴细胞浸润带靠近基底细胞层的部分,而CD8~+T淋巴细胞分布在淋巴细胞浸润带全层。其中,Th1细胞在口腔扁平苔藓组织中位于浸润带紧邻基底膜的部分,而Th2细胞则稍远离基底细胞膜。2.荧光实时定量PCR结果:口腔扁平苔藓粘膜组IFNγ的分泌均高于正常口腔粘膜组织,IL-10的分泌均低于正常口腔粘膜组织,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:1.与正常口腔粘膜组织相比,口腔扁平苔藓组中CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、Th1细胞、Th2细胞的数量增多且分布存在差异。提示各种T淋巴细胞在口腔扁平苔藓病变发生发展过程中各自发挥作用。2.与正常口腔粘膜组织相比,口腔扁平苔藓组中IFNγ,表达量增多、IL-10表达量减少,差异有统计学意义(P＜0.05)。具有促炎作用的IFNγ表达水平增高,而具有抗炎作用的IL-10表达水平降低,提示抗炎症反应和促炎症反应的不平衡在口腔扁平苔藓中的重要性。