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妊娠早期滋养层细胞对母体子宫有节制的侵润是胚胎植入成功的关键环节,这一过程有多种细胞外基质、蛋白酶等参与,并且受到来自母体子宫和滋养层细胞的多种细胞因子、生长因子和激素等的精确调控。本论文则研究了基质金属蛋白酶-26(MMP-26)和去整合素基质金属蛋白酶-19(ADAM-19)在人类滋养层细胞中的表达、调节及其对滋养层细胞侵润的影响,并研究了转化生长因子β(TGFβ)对滋养层细胞侵润和黏附的平衡调节,以探讨滋养层细胞有节制侵润的调控机制。
利用人正常妊娠和输卵管妊娠母胎界面模型,比较研究了MMP-26的表达模式。在两种模型中,MMP-26均分布于多种滋养层细胞中。正常妊娠滋养层细胞中,MMP-26于妊娠6-7周龄表达水平最高,从8周龄开始表达明显下降。而在输卵管妊娠母胎界面上,绒毛滋养层细胞中MMP-26的信号强度于妊娠3-9周龄持续高水平表达;在侵润性的绒毛外滋养层细胞中,MMP-26的表达随妊娠周龄的增加而明显增强。同时发现,在这一病理妊娠母胎界面上,母体组织中TGFβ1的水平远远低于正常妊娠的蜕膜组织,而滋养层细胞中TGFβ1的受体(TβRⅠ和TβRⅡ)水平亦显著低于正常妊娠。在NPC细胞中的实验表明TGFβ1可以下调MMP-26的表达,并上调其组织抑制因子TIMP-4的表达。细胞侵润实验显示MMP-26对NPC细胞的侵润有明显促进作用。这些结果表明,输卵管妊娠母胎界面上缺乏子宫蜕膜来源的细胞因子-TGFβ1,这一调节信号的缺失可能导致MMP-26的过量表达,这可能是输卵管妊娠过程中滋养层细胞过度侵润的分子基础之一。
为进一步理解TGFβ1对滋养层细胞侵润的调节机理,我们以NPC细胞为模型,探讨了TGFβ1对细胞侵润性和粘附性的调节。结果表明,TGFβ1在抑制NPC细胞侵润能力的同时,能够明显地促进细胞间的粘附。在这一过程中,细胞MMP-9的mRNA表达和酶原形式的分泌水平被明显地抑制,但MMP-2的表达和分泌没有变化;另一方面,介导细胞间粘附的分子-E-钙粘素和β-catenin的表达水平得以上调。TGFβ信号通路的关键信号分子Smad2的磷酸化的的水平受TGFβ1上调,其非磷酸化水平不发生改变。可见,滋养层细胞中细胞黏附和侵润是两个彼此关联和协调的过程,TGFβ1通过旁分泌机制平衡调节这两个过程。
去整合素基质金属蛋白酶-19(ADAM-19)是新近发现的ADAM家族成员,在胎盘组织中有较高水平的表达。利用RT-PCR、WesternBlotting和免疫组化方法,证实hADAM-19广泛表达于母胎界面上多种滋养层细胞中,其水平于妊娠早期较高,至妊娠中期和足月下调。在人正常细胞滋养层细胞系-NPC细胞中的研究表明TGFβ1上调hADAM-19的表达,呈现时间和剂量依赖性。进而在NPC细胞和人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞中发现,过表达hADAM-19可以使MMP-9的表达下调,从而降低滋养层细胞的侵润能力,同时E-cadherin的表达上调,细胞间的粘附能力增强。
此外,研究还发现hADAM-19和MMP-26在胎儿有核红细胞中有强烈表达,而在成熟红细胞中不表达。
上述研究表明,MMP-26和ADAM-19以不同的方式参与滋养层细胞的侵润过程,而来源于母体蜕膜的细胞因子-TGFβ1通过对细胞侵润和黏附能力的平衡调节实现对滋养层细胞侵润的有节制调控。