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奶牛酮病分为临床型和亚临床型。临床型酮病的特征是奶牛血液、尿液或乳汁中酮体的含量明显升高,临床表现食欲不振、体重下降、产奶量明显下降等。而亚临床酮病未表现明显的临床症状,但血液、尿液或乳汁中酮体含量超过正常水平。目前国内外,关于临床型酮病的报道已经较多,而有关亚临床酮病的研究相对较少。本试验选择21头年龄、胎次、泌乳量和泌乳天数相近的亚临床酮病奶牛(1.2mmol·L-1≤BHBA<2.2 mmol·L-1)和非酮病奶牛(BHBA<1.2 mmol·L-1),分成两组。分别于清晨饲喂前,通过尾静脉采集抗凝血,用于血液常规指标检测;采集非抗凝血,用于氧化抗氧化状态、肝功能和免疫指标检测;收集新鲜乳样用于乳成分检测。同时,体外培养奶牛原代肝细胞,并添加不同浓度的非酯化脂肪酸（NEFA）,分别刺激12、24和36 h,采用酶联免疫吸附法（ELISA）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测肝细胞中氧化抗氧指标的含量、活性及mRNA水平。试验结果显示:与非酮病奶牛相比,亚临床酮病奶牛白细胞总数（WBC）、淋巴细胞总数（LYM）显著降低（P<0.05）,平均血小板体积（MPV）极显著降低（P<0.01）,而中间细胞数（MID）、中性粒细胞数（NEU）、红细胞总数（RBC）、血小板总数（PLT）、血小板压积（PCT）和血小板分布宽度（PDM）均差异不显著（P>0.05）。乳脂肪比（MF）显著升高（P<0.05）,乳蛋白比（MP）和全脂乳固体比（TS）极显著降低（P<0.01）,而乳糖比（L）差异不显著（P>0.05）。总抗氧化能力（TAC）显著降低（P<0.05）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性极显著降低（P<0.01）,丙二醛（MDA）含量极显著升高（P<0.01）,超氧化物歧化酶（SOD）的活性有降低趋势,但差异不显著（P>0.05）。丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性显著升高（P<0.05）;总蛋白（TP）含量显著降低（P<0.05）;碱性磷酸酶（AKP）活性、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性、总胆红素（TB）、低脂密度胆固醇（LDL-c）含量极显著升高（P<0.01）;总胆固醇（TCH）、高脂密度胆固醇（HDL-c）和白蛋白（ALB）含量极显著降低（P<0.01）;乳酸脱氢酶（LDH）活性差异不显著（P>0.05）。免疫球蛋白IgG水平显著降低（P<0.05）;白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-8（IL-8）和干扰素-γ（IFN-γ）水平有下降趋势,但差异不显著（P>0.05）。不同浓度的NEFA均抑制了原代培养奶牛肝细胞中抗氧化指标（TAC、GSH-PX、SOD）的活性及mRNA表达水平,提高了丙二醛（MDA）的含量,并且呈现剂量依赖性。综上所述,亚临床酮病可造成奶牛肝功能指标发生变化;导致机体出现免疫抑制现象;体内和体外试验均证明了亚临床酮病可造成奶牛出现氧化应激。