喹诺酮类抗生素在畜产品中的广泛使用，已经引发了人们对药物残留和食品安全问题的关注。喹诺酮类抗生素包含一系列药物，传统的色谱分析法已经不能满足快速、简便、低成本、广谱性的检测，急需发展一种同时快速筛选喹诺酮类药物的方法。本研究的目的是设计多种免疫半抗原，制备具有广谱性检测的抗体。本研究采用EDC法将半抗原洛美沙星、环丙沙星分别与BSA偶联制备两种免疫抗原，同时将洛美沙星、环丙沙星、氧氟沙星三种药物混合后与BSA偶联制备混合免疫抗原。紫外-可见全波长扫描法鉴定偶联成功，可以用于动物免疫实验。　　制备的三种抗原分别免疫新西兰大白兔，每隔21天免疫一次，共免疫5次，最后一次免疫后8天采血。血清效价和抑制检测结果表明所获得的三种抗体能识别目标物。采用同源包被和异源包被比较抗体的灵敏度和广谱性，优选最佳条件，绘制标曲，建立酶联免疫检测方法，并评价抗体的灵敏度和特异性。　　洛美沙星抗体在同源包被情况下，对洛美沙星药物达到50％抑制率(IC50)时的浓度为1.29 ng mL-1。如果以100 ng mL-1为识别阈值，则洛美抗体可以识别24种喹诺-酮类药物中的11种：加替沙星、克林沙星、加雷沙星、培氟沙星、洛美沙星、达氟沙星、萘啶酸、吡哌酸、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星。　　环丙沙星抗体在以洛美沙星偶联物为异源包被时，对环丙沙星的IC50为6.52 ngmL-1，并且可以同时识别24种喹诺酮类药物中的18种：加替沙星、克林沙星、加雷沙星、培氟沙星、洛美沙星、左旋氧氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星、达氟沙星、二氟沙星、麻保沙星、莫西沙星、芦氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、普卢利沙星、恶喹酸。　　消旋氧氟沙星抗体在以消旋氧氟沙星偶联物为同源包被时，对消旋氧氟沙星的IC50为0.03 ng mL-1，并且可以同时识别24种喹诺酮类药物中的14种：加雷沙星、右旋氧氟沙星、托氟沙星、司帕沙星、达氟沙星、二氟沙星、麻保沙星、芦氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、恶喹酸。奇怪的是三种半抗原混合后制备的混合抗原免疫所得的混合抗体，在以消旋氧氟沙星为包被原时，该抗体可以识别24种喹诺酮类药物中的大多数，只有加替沙星、沙拉沙星、莫西沙星不能识别，并且与其他三种单一抗原免疫所得的抗体相比，混合抗原免疫所得的抗体具有更高的灵敏度，其对大多数喹诺酮类药物的IC50都低于1 ng mL-1，仅对克林沙星、司帕沙星、普卢利沙星没如此高的灵敏度。　　因此，本文选择混合抗体来建立喹诺酮类药物多残留检测方法。所建立的方法对21种喹诺酮类药物的检测限(LOD)都低于1 ng mL-1。这也表明相对于单个半抗原偶联后制备的抗体，多种半抗原混合后制备的免疫原免疫所得的抗体具有更高的广谱性。总之，最终要建立高灵敏、广谱性的喹诺酮类药物的免疫检测方法，首先需要三种半抗原同时偶联在载体蛋白上，之后才能获得特异性高、广谱性好的抗体，进而建立同时检测多种喹诺酮类药物的方法。