Faecalibacterium prausnitzii上清抑制TLR4/NF-κB信号对实验性结肠炎小鼠的保护作用

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背景与目的:Faecalibacterium prausnitzii(F.prausnitzii)是一种肠道的共生厌氧菌,主要存在于回肠末端和回盲部,能够参与维持肠道健康并能为肠道细胞提供能量,它在炎症性肠病患者肠道组织中中的数量明显下降,在动物实验中则发现它能明显改善实验性结肠炎小鼠的肠道炎症。本实验以DSS诱导建立实验性结肠炎小鼠模型,然后用F.prausnitzii上清灌胃处理,观察其对实验性结肠炎的抗炎作用,以及其对TLR4/NF-kB信号通路和下游细胞因子的的影响。方法:将24只小鼠分为健康对照组、结肠炎组、F.prausnitzii.上清干预组。结肠炎组和F.prausnitzii上清干预组从实验开始第1天至第5天连续饮用3.5%DSS来建立急性DSS结肠炎模型,健康对照组自由饮用洁净水,F.prausnitzii上清干预组从实验开始第1天至第7天实验结束,每天给予F.prausnitzii上清灌胃干预。观察各组小鼠体重变化、结肠缩短情况、结肠组织病理情况。PCR法检测各组小鼠肠道组织TLR4、p-NF-kB水平。免疫组化检测肠道组织中NF-kB的表达水平。ELISA法检测血浆中TNF-a、IL-6、COX-2的浓度。结果:和健康对照组相比,结肠炎组的体重下降(p<0.01),结肠长度缩短(p<0.05),HE病理评分增高(p<0.001);而在F.prausnitzii上清干预组,小鼠体重较炎症组下降减少(p<0.05),结肠组织大体形态改善,结肠长度缩短程度小于炎症组(p<0.01),HE评分有所下降(p<0.05)。和健康对照组相比,结肠炎组结肠组织TLR4的mRNA水平升高(p<0.001)、p-NF-kB的mRNA水平(p<0.05)和蛋白质(p<0.001)表达升高;而F.prausnitzii上清干预组结肠组织TLR4的mRNA水平(p<0.01)、p-NF-kB的蛋白质(p<0.001)表达均较结肠组下降,p-NF-kB的mRNA水平较炎症组降低,但差异没有统计学意义。和健康对照组相比,结肠炎组血浆中 TNF-a(p<0.001)、IL-6(p<0.01)、COX-2(p<0.05)的表达明显升高;而F.prausnizii 上清干预组中,血浆TNF-a、IL-6、COX-2水平均较结肠炎组下降,p值均<0.05。结论:F.prausnitzii上清对DSS诱导的实验性结肠炎有显著的预防和治疗作用,其治疗机制可能与抑制TLR4/NF-kB信号通路,降低炎性因子及炎性介质的表达有关。
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