体外循环回路对预充液中舒芬太尼浓度的影响

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuzhiwei00
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目的:通过测定离体预充时体外循环回路中舒芬太尼浓度的变化,来探讨体外循环回路系统是否对舒芬太尼有吸附作用。   方法:本研究共分实验组(A组)和对照组(B组)两组。体外循环回路由成人大号鼓泡式氧合器、储血器、成人体外循环管路(内径10mm)、成人微栓滤器组成。实验组(A组n=6):在体外循环设备中预充2000ml液体(1000ml乳酸钠林格氏液,1000ml琥珀酰明胶注射液)。4L·min-1转机,2L·min-1吹入氧气。温度维持在32℃~34℃,变温器维持。从氧合器加药口加入舒芬太尼15μg,预测浓度为7.5ng·ml-1,在转机之前快速给入。在加药后第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90分钟从氧合器动脉端的三通抽取样品1.5ml放入一个1.5ml尖底硅硼酸玻璃离心管中。样品立即冷冻保存于-20℃冰上,直至分析。对照组(B组n=6):在玻璃容器内按上述比例加入晶体液和胶体液共计2000ml,加入舒芬太尼15μg,使预测浓度为7.5ng·ml-1,温度维持在32℃~34℃,2L·min-1吹入氧气。在加药后第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90分钟时取样品1.5ml放入一个1.5ml的尖底硅硼酸玻璃离心管中。样品于-20℃冰上保存,直至分析。   采用气相色谱一质谱法分析药物浓度。制作标准曲线采用最小二乘法,应用芬太尼为内标。具体操作:采用二次萃取法,将1ml样品漩涡混匀,加入内标芬太尼10ng,漩涡混匀30s,然后加入2ml石油醚,漩涡10min,室温下平衡1min,取上层液转入一个干净的10ml玻璃离心管中,样品再加入2ml石油醚,漩涡10min,室温下平衡1min,取上层液再转入同一个干净的10ml玻璃离心管中放在氮吹仪上,在室温下用氮气吹干。残留物定容在200μl甲醇中,漩涡30s,混匀,转入500μl玻璃小管中,自动进样器设定在自动进样1μ1到程序升温器中分析。色谱条件设定为,色谱柱在进样前维持130℃保持平衡,在进样后保持此温度2.5分钟。接着柱温以50℃·min-1的速度由130℃升温到210℃,然后以6℃.min-1的速度由210℃升温到285℃,接着柱温以50℃.min-1由285℃跃升到320℃,并且在320℃保持2分钟。进样口被加热到290℃。转换线被加热到300℃。超纯氦气流速为1ml.min-1。采用离子选择(SIM)模式来提高检测程度的敏感性。选用EI源、离子源温度230℃、四级杆温度150℃、电子轰击能量70eV、倍增电压2112V、选择性离子监测模式(SIM),测定芬太尼及舒芬太尼质荷比,测得峰面积,并通过标准曲线得到药品浓度。   为评价本方法的可行性,本研究还测定了日间及日内精密度、方法回收率及萃取回收率。配制舒芬太尼浓度分别为0.2、0.3、0.5、1、5、10ng·ml-1的预充溶液样品,标本处理同上(n=6),对低、中、高3种舒芬太尼浓度(0.2,1,10ng·ml-1)样品分别于1天内进行5次处理测定与5天内5次处理测定,计算日内及日间精密度。同样处理此3浓度的样本各6份,按样品测定方法处理后进样,测定舒芬太尼对内标峰面积比。各浓度6份样品的测定结果取平均值后分别代入标准曲线,得到舒芬太尼浓度,并于预测浓度相比,计算方法回收率。另用配制相应浓度的舒芬太尼和内标液,不经萃取直接进相同量的样,测定其舒芬太尼对内标峰面积比,计算萃取回收率。   结果:   1、以舒芬太尼与芬太尼的峰面积比(Y)为纵坐标,舒芬太尼的浓度(X)为横坐标,绘制标准曲线,计算得回归方程:Y=0.1625X+0.0316,r=0.9987,(n=6)P<0.01。结果舒芬太尼溶液浓度在0.2~10ng.ml-1范围内,线性关系良好。在本实验条件下,舒芬太尼的最低检测限为:0.02ng·ml-1。在0.2、1、10ng·ml-1三种浓度时,萃取回收率分别为83.38±3.91%、87.04±3.05%、88.96±2.69%;精密度为4.69%、3.58%、3.02%。方法回收率分别为98±6.09%、97±3.69%、112±5.72%;精密度为6.21%、3.80%、3.02%。日内精密度为5.85%、3.51%、3.11%;日间精密度为7.56%、5.26%、6.49%。本方法用芬太尼做内标,舒芬太尼提取效果好,样品中杂质无干扰,样品中的内源性物质与舒芬太尼及内标物能很好的分离,不干扰舒芬太尼的测定。舒芬太尼的保留时间为8.28min,芬太尼的保留时间为7.68min,二者波形均良好。   2、对照组(B组)中舒芬太尼的浓度较为稳定,虽然较预测浓度有所下降,但无显著性差异。实验组(A组)中,循环开始后,舒芬太尼的浓度首先显著下降。随转机时间的增加,浓度开始回升接近至转机前的水平,7分钟左右时浓度在整个实验过程最高,然后浓度又缓慢下降,直至最低,保持较稳定。在实验最后阶段,A组的浓度为1.82±0.19ng·ml-1,与初始预测浓度相比有显著性改变;而B组的浓度为7.49±0.02ng·ml-1,与初始预测浓度相比无显著性意义。   结论:   1、建立了一种稳定的实验方法,气相色谱质谱联用检测舒芬太尼浓度,最低检测限达到0.02ng·ml-1。   2、目前临床应用的体外循环回路对舒芬太尼有明显吸附作用。   3、离体体外循环对舒芬太尼的浓度影响较大,提示临床麻醉时及时调整麻醉深度。
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