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前列腺肿瘤细胞分泌的细胞因子IL-8有促进肿瘤的发展以及浸润的作用,特别是在非雄性激素依赖的前列腺肿瘤细胞中。越来越多的Microarray和动物模型的实验证据显示转录因子EGR-1在肿瘤的发生和发展中起着重要作用。然而EGR1促进肿瘤发展的分子机制是未知的,这个过程中是否有IL-8的参与?
这个项目中我们发现利用RNAi特异性敲低前列腺肿瘤细胞DU145中EGR-1的表达后,细胞中IL-8的mRNA水平和蛋白水平均有显著的降低。同时在另一个本底表达EGR-1很低的前列腺肿瘤细胞系PC3中高表达EGR-1后,发现细胞中IL-8的mRNA水平和蛋白水平均有显著的增加。我们通过构建一系列的野生型和突变的IL-8启动子的报告基因质粒来对IL-8 promoter进行深入的分析,发现EGR1调控IL-8是依赖NF-kB位点的,并且敲低EGR1会影响EGR-1和NF-κB形成复合物,这个复合物对IL-8的表达有重要调控作用。
EGR1对IL-8的调控有着非常重要的生物学意义,我们发现特异性敲低EGR-1后,IL-8的合成和分泌都显著降低,同时也明显降低了前列腺肿瘤细胞的克隆形成能力和浸润能力。而当向培养的细胞中加入外源的细胞因子IL-8后,细胞的克隆形成能力和浸润能力都有明显的上升,恢复到比对照略高或者和对照相当的水平。
此项目深入细致地探讨了EGR-1调控细胞因子IL-8的机制,以及IL-8在肿瘤的增生和转移中的重要功能。EGR-1对IL-8的调控可能作为治疗前列腺肿瘤转移的一个靶点,特别是对于雄性激素非依赖的前列腺肿瘤。