目的：　　对临床分离副溶血弧菌进行毒力特征、分子特征和溯源研究。分析O3∶K6大流行克隆株在临床分离株中的分布特点;分析大流行株和其他菌株的遗传进化关，为副溶血弧菌致病性相关遗传变异研究提供依据。　　方法：　　1、患者临床资料统计　　通过医生工作站获取患者临床资料;通过LIS系统统计2009～2011年肠道门诊细菌性腹泻病原菌种类及数量。　　2、毒力基因检测　　聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，PCR)检测菌株直接溶血毒素基因(tdh)、TDH-相关溶血毒素基因(trh)、Ⅲ型分泌系统2基因(T3SS2α、T3SS2β)及O3∶K6克隆群系统性毒力基因（toxRS/new、orf8）。　　3、分析大流行株、致病株和非致病株在临床中的分布特点　　根据毒力基因携带情况，副溶血弧菌可分为大流行株、致病株和非致病株。tdh阳性、toxRS/new阳性、trh阴性为大流行株，仅tdh或/和trh阳性为致病株，tdh和trh均阴性为非致病株。按照此依据对152株菌进行分类。　　4、特殊菌株特征分析　　对实验中8株特殊菌（1株携带orf8的致病株、6株携带orf8和toxRS/new的非致病株及1株同时携带全部毒力基因的菌株）毒力基因产物进行测序。同时分析其分子分型特征和患者的临床特征。　　5、多位点序列分型　　采用多位点序列分型(multilocussequencetyping，MLST)技术对菌株进行分子分型和同源性研究。　　结果：　　1、患者临床特征分析　　2009～2011年副溶血弧菌在细菌性腹泻中发病率为34.05％。患者临床特征如下:以男性居(67％，102/152);年龄以20～50岁为主(79％，120/152);时间集中在每年7～9月(87％，132/152)，其中8月份最多(46％，70/152);可疑食物以海水产品和熟食冷荤为主，二者比例接近1∶1;75％(114/152)的患者伴有低热和脐周腹痛，粪便以稀便和水样便为主，镜下多伴白细胞。　　2、毒力基因携带率　　tdh携带率为96.05％(146/152)，trh携带率为1.97％(3/152)。T3SS2携带率为100％(152/152)，其中149株T3SS2α阳性，2株T3SS2β阳性，1株T3SS2α和T3SS2β均阳性。toxRS/new携带率为75.66％(115/152)，orf8携带率为75％(114/152)。　　3、大流行株、致病株及非致病株分布特点　　研究分离到大流行株107株(70.4％，107/152)，致病株38株(25.0％，38/152)，非致病株6株(3.9％，6/152)。并非所有大流行株含有orf8，2株(1.9％，2/107)缺乏orf8;另发现一株分离于2009年的菌株携带全部毒力基因，定义为高毒株。　　4、特殊菌株特征分析　　携带orf8的致病株序列型为ST3，属CC3同源复合体。6株非致病株均携带大流行株的标志基因orf8和toxRS/new且其序列型均为ST3，属CC3。另外发现2009年分离的一株菌携带全部毒力基因，属ST199型，为散发株。该高毒株感染者为70岁男性患者，为本研究中最大患者，但其临床表现与其他病人无明显差异。　　5、多位点序列分型(MLST)　　152株副溶血弧菌共有16个STs型。ST3为最常见ST型（包含113株菌），属CC3。其中ST431、ST432、ST478、ST479为4种新发现的ST型。　　结论：　　1、副溶血弧菌感染发病有明显季节性，以夏季为主，8月为发病高峰。可疑食物不再以海产品为主，食用熟食冷荤食物也可引起该菌感染。推测副溶血弧菌可以通过污染其他食品引起人类感染　　2、本研究分离的副溶血弧菌绝大多数携带tdh，少数携带trh。T3SS2携带率达100％，说明T3SS2在副溶血弧菌致病中起重要作用，这点对非致病株而言尤其重要。　　3、本研究分离副溶血弧菌以大流行株为主。非致病菌在进化过程中首先获得了大流行株的标志基因toxRS/new和orf8。　　4、本研究分离副溶血弧菌以ST3型为主，同全球其他地方流行株一样，同属CC3同源复合体。