七叶皂甙钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤及IL-17、TNF-α表达的影响

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目的:观察七叶皂甙钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤及白细胞介素-17(IL-17)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。  方法:将180只健康无眼疾SD大鼠随机分为正常组、模型组、七叶皂甙钠低剂量组和高剂量组四组,每组45只;每组再按照12h、24h、72h和144h四个不同的时间段再分为四个小组。采用前房灌注生理盐水升高眼压法建立RIRI模型。右眼为实验眼,正常组右眼不作任何处理。七叶皂甙钠低剂量组和高剂量组于建模前30min和建模后每天定时分别以5mg/Kg和10mg/Kg腹腔注射七叶皂甙钠溶液。建模后12h、24h、72h和144h处死大鼠,取眼球,分别作苏木精-伊红染色观察视网膜组织结构变化;免疫组化和实时荧光定量PCR分别检测IL-17、TNF-α蛋白和mRNA表达。  结果:苏木精-伊红染色染色观察正常组大鼠视网膜组织结构正常,细胞排列紧密;模型组、七叶皂甙钠低剂量组出现视网膜水肿、组织疏松等病理改变,而七叶皂甙钠高剂量组视网膜组织结构与正常组相似。免疫组化显示IL-17、TNF-α主要表达于视网膜神经节细胞层。在正常组视网膜中鲜有表达,而在模型组、七叶皂甙钠低剂量组表达明显增多。实时荧光定量PCR发现TNF-α和IL-17 mRNA分别在建模后24h、72h达高峰。建模后各时间点模型组、七叶皂甙钠低剂量组和高剂量组IL-17、TNF-αmRNA的表达均较正常组升高,差异有显著性。七叶皂甙钠低剂量组12h、72h与144h TNF-αmRNA表达较模型组降低,差异有显著性,24h TNF-αmRNA表达虽较模型组降低,但差异无显著性;高剂量组各时间点TNF-αmRNA表达较模型组明显降低,差异有显著性;高剂量组各时间点TNF-αmRNA表达较低剂量组下降,差异有显著性。七叶皂甙钠低剂量组24h、72h与144h IL-17 mRNA表达较模型组降低,差异有显著性,12h IL-17 mRNA表达虽较模型组降低,但差异无显著性;高剂量组各时间点IL-17 mRNA表达较模型组明显降低,差异有显著性;七叶皂甙钠高剂量组各时间点 IL-17 mRNA表达较低剂量组下降,差异有显著性。  结论:  1) IL-17和TNF-α在大鼠RIRI后视网膜组织中有表达,分别在24h、72h出现峰值,可能在亚急性期参与了RIRI后的炎症反应过程,为药物干预提供了时间窗。  2)七叶皂甙钠降低RIRI后IL-17和TNF-α表达,提示可能一定程度上抑制了视网膜炎症反应,对视网膜有保护作用。
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